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1、 目的:脊髓神經(jīng)的損傷和疾病往往帶來(lái)永久性的功能喪失或障礙。目前處于探索之中的治療方案之一是進(jìn)行生物移植,嗅神經(jīng)鞘細(xì)胞(OECs)就是備選移植物的一種。而硫酸軟骨素蛋白聚糖類分子(CSPGs)是損傷后形成的膠質(zhì)瘢痕中抑制神經(jīng)再生的一類物質(zhì)。本研究即旨在探討OECs移植的治療作用是否與影響CSPGs類分子的表達(dá)相關(guān)。 方法:1.嗅鞘細(xì)胞(OECs)分離培養(yǎng):根據(jù)改良Nash法,取成年Wistar大鼠嗅球,培養(yǎng)純化嗅鞘細(xì)胞。并經(jīng)S-P
2、法做P75抗體免疫組化染色鑒定。2.動(dòng)物模型建立、分組及顯微注射移植:選取成年Wistar大鼠,于T10水平橫斷左半側(cè)脊髓。動(dòng)物隨機(jī)分為治療組和對(duì)照組,分別顯微注射嗅鞘細(xì)胞懸液和無(wú)細(xì)胞培養(yǎng)液。3.對(duì)模型動(dòng)物運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分:移植術(shù)后取數(shù)個(gè)時(shí)點(diǎn),按照BBB評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)對(duì)模型評(píng)分,對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。4.Westernblot檢測(cè):移植術(shù)后一個(gè)月,對(duì)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組動(dòng)物直接取材,包含脊髓損傷處長(zhǎng)度約1.5cm的一段標(biāo)本,經(jīng)處理,行Westernb
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