硫酸軟骨素提取工藝的研究_第1頁(yè)
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1、本文由cmylxjj貢獻(xiàn)pdf文檔可能在WAP端瀏覽體驗(yàn)不佳。建議您優(yōu)先選擇TXT,或下載源文件到本機(jī)查看。維普資訊第24卷第6期2007年l2月生物學(xué)雜志joURNAILYLOFBOOGVo4No612De20e,07硫酸軟骨素提取工藝的研究魏練平,蔣立科(安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,徽安摘合肥203)306要:硫酸軟骨素是生物界廣泛存在的酸性粘多糖,廣泛存在于動(dòng)物的器官軟骨。以豬器官軟骨為原料,采用堿提取和酶解相結(jié)合的方法提取硫酸軟骨

2、素,用正交實(shí)驗(yàn)對(duì)堿提取過(guò)程中的溫度,濃度以及提取時(shí)間等三個(gè)關(guān)利堿鍵因素進(jìn)行優(yōu)化,并對(duì)硫酸軟骨素成品的相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)。正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,最佳的堿提取條件為:溫度4℃、取時(shí)間8、提取濃度為01gm。在此條件下獲得的堿提取液,過(guò)酶解、色、沉、燥,到白色0提h堿5/L通脫醇干得硫酸軟骨素成品,總得率為2%,項(xiàng)指標(biāo)均符合國(guó)家部頒標(biāo)準(zhǔn),到出口要求。0各達(dá)關(guān)鍵詞:酸軟骨素;軟骨;交法硫豬正中圖分類號(hào):58Q3文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):086220)6

3、~05—310—93(070050硫酸軟骨素(hnrtlt,s是在生物界廣codoisfec)inua泛存在的酸性粘多糖一糖胺聚糖(loaigcngcsmnla,yoy中國(guó)是一個(gè)農(nóng)牧業(yè)大國(guó),、、豬牛羊及其他許多動(dòng)物的飼養(yǎng)量和屠宰都位于世界前列,以生產(chǎn)硫酸軟所GG)自然界中的硫酸軟骨素主要分布于動(dòng)物的軟As,骨、喉骨、骨、、中膈和氣管中,鼻牛馬其他如腿骨、韌帶、皮膚、角膜等組織中也含有。魚(yú)類軟骨中含量很豐富,如鯊魚(yú)骨中含5%~0,06%結(jié)

4、締組織中含量很少。腔腸動(dòng)物、綿動(dòng)物、生動(dòng)物也含有硫酸軟骨素。海原骨素的原料來(lái)源廣泛。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,中國(guó)有為數(shù)不少的廠家在生產(chǎn)硫酸軟骨素,技術(shù)上看,內(nèi)提取硫酸從國(guó)軟骨素的方法很多,括高壓法,性鹽法,提法,包中堿酶解法等,但是現(xiàn)行的工藝還比較粗糙,產(chǎn)品多數(shù)為粗其制品,主要在國(guó)內(nèi)使用,有少數(shù)精制品出口到國(guó)外。只從經(jīng)濟(jì)效益上看,制造精品比制造粗制品利潤(rùn)要高得豬器官軟骨,購(gòu)于合肥肉聯(lián)廠;萄糖醛酸、葡咔唑,Sm公司;iag間苯三酚,馬斯亮藍(lán),la司;

5、考Fu公k胃蛋白酶、胰蛋白酶,華美生物工程公司;牛血清白蛋白,上海第二醫(yī)科大學(xué);其它試劑進(jìn)口或國(guó)產(chǎn)分析純。Utse10型紫外/見(jiàn)分光光度計(jì);顯恒lopc30r可數(shù)溫水浴鍋H一2(H國(guó)華電器有限公司)電子天平;F10(A14上海民橋精密科學(xué)儀器有限公司)可見(jiàn)分光;光度計(jì)72(2S上海精密科學(xué)儀器有限公司)循環(huán)水真;空泵SZ一Ⅲ(海亞榮生化儀器廠)低速離心機(jī)H上;LJX一Ⅱ(B上海安亭科學(xué)儀器廠)電熱恒溫鼓風(fēng)干燥;箱DG一45上海一恒科技有

6、限公司)H92A(。12實(shí)驗(yàn)方法堿提取,獲得堿提取液。酶解:將上述堿提取液冷卻至室溫,調(diào)節(jié)pH值至80加入3的胰蛋白酶,,%充分?jǐn)噭?,4 ̄于0C酶解2。h后將酶解液用H1pC調(diào)H值至60在添加3,%的胃蛋白酶,同樣于4 ̄0C酶解2h后,10C沸水中進(jìn)行酶在0 ̄的鈍化。酶解完畢后用三氯乙酸除蛋白,1%的三將0氯乙酸直接加到酶解液中,邊加邊攪拌即產(chǎn)生沉淀,將其于4℃靜置過(guò)夜,后離心得上清液。脫色:上清液加入5的活性碳,4 ̄將%于0C吸附2,

7、心取上清液。h離醇沉:加入2倍體積的9%的乙醇,45于℃靜置過(guò)夜,離心所得沉淀,進(jìn)行干燥,即得到豬硫酸軟骨素的粉末。13硫酸軟骨素的指標(biāo)檢測(cè)121軟骨的處理將軟骨投入8℃恒溫蒸煮鍋中0煮3—h撈起洗去肉與油脂,入一0速凍,4,放2℃使骨質(zhì)疏松。使用前取出,入電熱干燥箱于8℃烘干3放0~131硫酸軟骨素的得率上述123工藝制備得到的硫酸軟骨素產(chǎn)品的質(zhì)量占骨粉質(zhì)量的百分比。4,h用粉碎機(jī)粉碎成粉末狀,即為骨粉。122堿提取條件的篩選分別稱取

8、5骨粉于燒杯g中,加入4倍體積的蒸餾水,根據(jù)正交試驗(yàn)(1卜表與表2在各自既定的條件下反應(yīng),應(yīng)時(shí)間結(jié)束后,)反將提取液離心取上清液。調(diào)節(jié)上清液的pH值至70,加入2倍體積的9%的乙醇, ̄54C靜置過(guò)夜,后離心干燥,C得S粗制品。以CS的得率以及粗制品中葡萄糖132含量測(cè)定間苯三酚分光光度法,參考文獻(xiàn)[]4133葡萄糖醛酸含量的測(cè)定參考文獻(xiàn)[]以葡5,萄糖醛酸作為標(biāo)準(zhǔn)品。表3正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果Tbe3Reutorooaeialslfotgnlds

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