硫酸軟骨素提取工藝的研究

1、本文由cmylxjj貢獻(xiàn)pdf文檔可能在WAP端瀏覽體驗不佳。建議您優(yōu)先選擇TXT，或下載源文件到本機(jī)查看。維普資訊第２４卷第６期２００７年ｌ２月生物學(xué)雜志ｊｏＵＲＮＡＩＬＹＬＯＦＢＯＯＧＶｏ４Ｎｏ６１２Ｄｅ２０ｅ，０７硫酸軟骨素提取工藝的研究魏練平，蔣立科（安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，徽安摘合肥２０３）３０６要：硫酸軟骨素是生物界廣泛存在的酸性粘多糖，廣泛存在于動物的器官軟骨。以豬器官軟骨為原料，采用堿提取和酶解相結(jié)合的方法提取硫酸軟骨

2、素，用正交實驗對堿提取過程中的溫度，濃度以及提取時間等三個關(guān)利堿鍵因素進(jìn)行優(yōu)化，并對硫酸軟骨素成品的相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行檢測。正交實驗結(jié)果表明，最佳的堿提取條件為：溫度４℃、取時間８、提取濃度為０１ｇｍ。在此條件下獲得的堿提取液，過酶解、色、沉、燥，到白色０提ｈ堿５／Ｌ通脫醇干得硫酸軟骨素成品，總得率為２％，項指標(biāo)均符合國家部頒標(biāo)準(zhǔn)，到出口要求。０各達(dá)關(guān)鍵詞：酸軟骨素；軟骨；交法硫豬正中圖分類號：５８Ｑ３文獻(xiàn)標(biāo)識碼：Ａ文章編號：０８６２２０）６

3、～０５—３１０—９３（０７００５０硫酸軟骨素（ｈｎｒｔｌｔ，ｓ是在生物界廣ｃｏｄｏｉｓｆｅｃ）ｉｎｕａ泛存在的酸性粘多糖一糖胺聚糖（ｌｏａｉｇｃｎｇｃｓｍｎｌａ，ｙｏｙ中國是一個農(nóng)牧業(yè)大國，、、豬牛羊及其他許多動物的飼養(yǎng)量和屠宰都位于世界前列，以生產(chǎn)硫酸軟所ＧＧ）自然界中的硫酸軟骨素主要分布于動物的軟Ａｓ，骨、喉骨、骨、、中膈和氣管中，鼻牛馬其他如腿骨、韌帶、皮膚、角膜等組織中也含有。魚類軟骨中含量很豐富，如鯊魚骨中含５％～０，０６％結(jié)

4、締組織中含量很少。腔腸動物、綿動物、生動物也含有硫酸軟骨素。海原骨素的原料來源廣泛。據(jù)文獻(xiàn)報道，中國有為數(shù)不少的廠家在生產(chǎn)硫酸軟骨素，技術(shù)上看，內(nèi)提取硫酸從國軟骨素的方法很多，括高壓法，性鹽法，提法，包中堿酶解法等，但是現(xiàn)行的工藝還比較粗糙，產(chǎn)品多數(shù)為粗其制品，主要在國內(nèi)使用，有少數(shù)精制品出口到國外。只從經(jīng)濟(jì)效益上看，制造精品比制造粗制品利潤要高得豬器官軟骨，購于合肥肉聯(lián)廠；萄糖醛酸、葡咔唑，Ｓｍ公司；ｉａｇ間苯三酚，馬斯亮藍(lán)，ｌａ司；

5、考Ｆｕ公ｋ胃蛋白酶、胰蛋白酶，華美生物工程公司；牛血清白蛋白，上海第二醫(yī)科大學(xué)；其它試劑進(jìn)口或國產(chǎn)分析純。Ｕｔｓｅ１０型紫外／見分光光度計；顯恒ｌｏｐｃ３０ｒ可數(shù)溫水浴鍋Ｈ一２（Ｈ國華電器有限公司）電子天平；Ｆ１０（Ａ１４上海民橋精密科學(xué)儀器有限公司）可見分光；光度計７２（２Ｓ上海精密科學(xué)儀器有限公司）循環(huán)水真；空泵ＳＺ一Ⅲ（海亞榮生化儀器廠）低速離心機(jī)Ｈ上；ＬＪＸ一Ⅱ（Ｂ上海安亭科學(xué)儀器廠）電熱恒溫鼓風(fēng)干燥；箱ＤＧ一４５上海一恒科技有

6、限公司）Ｈ９２Ａ（。１２實驗方法堿提取，獲得堿提取液。酶解：將上述堿提取液冷卻至室溫，調(diào)節(jié)ｐＨ值至８０加入３的胰蛋白酶，，％充分?jǐn)噭?，４￣于０Ｃ酶解２。ｈ后將酶解液用Ｈ１ｐＣ調(diào)Ｈ值至６０在添加３，％的胃蛋白酶，同樣于４￣０Ｃ酶解２ｈ后，１０Ｃ沸水中進(jìn)行酶在０￣的鈍化。酶解完畢后用三氯乙酸除蛋白，１％的三將０氯乙酸直接加到酶解液中，邊加邊攪拌即產(chǎn)生沉淀，將其于４℃靜置過夜，后離心得上清液。脫色：上清液加入５的活性碳，４￣將％于０Ｃ吸附２，

7、心取上清液。ｈ離醇沉：加入２倍體積的９％的乙醇，４５于℃靜置過夜，離心所得沉淀，進(jìn)行干燥，即得到豬硫酸軟骨素的粉末。１３硫酸軟骨素的指標(biāo)檢測１２１軟骨的處理將軟骨投入８℃恒溫蒸煮鍋中０煮３—ｈ撈起洗去肉與油脂，入一０速凍，４，放２℃使骨質(zhì)疏松。使用前取出，入電熱干燥箱于８℃烘干３放０～１３１硫酸軟骨素的得率上述１２３工藝制備得到的硫酸軟骨素產(chǎn)品的質(zhì)量占骨粉質(zhì)量的百分比。４，ｈ用粉碎機(jī)粉碎成粉末狀，即為骨粉。１２２堿提取條件的篩選分別稱取

8、５骨粉于燒杯ｇ中，加入４倍體積的蒸餾水，根據(jù)正交試驗（１卜表與表２在各自既定的條件下反應(yīng)，應(yīng)時間結(jié)束后，）反將提取液離心取上清液。調(diào)節(jié)上清液的ｐＨ值至７０，加入２倍體積的９％的乙醇，￣５４Ｃ靜置過夜，后離心干燥，Ｃ得Ｓ粗制品。以ＣＳ的得率以及粗制品中葡萄糖１３２含量測定間苯三酚分光光度法，參考文獻(xiàn)［］４１３３葡萄糖醛酸含量的測定參考文獻(xiàn)［］以葡５，萄糖醛酸作為標(biāo)準(zhǔn)品。表３正交實驗結(jié)果Ｔｂｅ３Ｒｅｕｔｏｒｏｏａｅｉａｌｓｌｆｏｔｇｎｌｄｓ