FOXL2基因在不同日齡蛋雞卵巢中的表達研究.pdf

1、FOXL2基因是在脊椎動物中最先發(fā)現(xiàn)的與卵巢分化有關(guān)的的性別二態(tài)性標(biāo)記，同時也是人類常染色體基因中第一個被認定在促進人的眼瞼的早期發(fā)育、卵巢發(fā)育和維持卵巢功能方面具有重要作用的因子。隨著人們對于相關(guān)研究的不斷加深，發(fā)現(xiàn)在人的眼瞼、胚胎及成體卵巢顆粒細胞中FOXL2基因均呈現(xiàn)出特異性的表達，與人的卵巢早衰、卵巢腫瘤、不孕不育、性別決定以及小眼瞼裂綜合征等病癥有關(guān)。FOXL2基因在抑制卵泡凋亡和促進卵巢儲備功能方面發(fā)揮著重要作用，其正常表達

2、對雞產(chǎn)蛋性能高低和卵巢發(fā)育程度很重要。但FOXL2基因在不同時期的產(chǎn)蛋雞體內(nèi)各組織器官中的表達情況以及與蛋雞卵巢發(fā)育不同時期的相關(guān)性仍未見報道。
　　本研究首先通過HE染色法觀察不同時期海蘭褐蛋雞卵巢的發(fā)育情況和組織學(xué)結(jié)構(gòu)，并通過進行卵泡數(shù)量的統(tǒng)計學(xué)分析，研究蛋雞卵巢卵泡的具體發(fā)育狀況。根據(jù)GenBank上收錄的紅原雞的FOXL2基因序列(登錄號：JF_708868)，通過生物信息學(xué)分析其保守序列及酶切位點，利用 Primmer_

3、5.0設(shè)計并合成3對引物。通過瓊脂糖凝膠電泳試驗，篩選出最優(yōu)引物。采集30日齡，60日齡，90日齡，120日齡、160日齡、220日齡、330日齡、480日齡共8個時期的蛋雞的下丘腦、眼瞼、肌肉、心臟、胸腺、肝臟、脾臟、腎臟組織樣品，進行qR T-PCR試驗。對比不同時期卵巢中FOXL2基因相對表達量的差異，分析FOXL2基因與雞卵巢發(fā)育及其與產(chǎn)蛋性能的相關(guān)性；對比FOXL2基因在不同時期和不同組織中相對表達量的變化，分析FOXL2基因

4、與蛋雞機體發(fā)育的相關(guān)性。HE染色和統(tǒng)計學(xué)分析結(jié)果表明，220日齡卵巢的體積和重量最大，之后卵巢逐漸萎縮，重量減少；隨日齡增加，總卵泡數(shù)逐漸減少，初級卵泡數(shù)呈現(xiàn)先增加后減少趨勢，60日齡的初級卵泡數(shù)最高，然后逐漸減少；120日齡的次級卵泡數(shù)最高，并且明顯高于其他日齡產(chǎn)蛋雞；從30日齡開始，隨日齡增加，卵泡閉鎖率逐漸增多。qRT-PCR試驗結(jié)果表明，120日齡雞卵巢中FOXL2基因的相對表達量高于其他日齡。FOXL2的表達與蛋雞卵巢發(fā)育存在