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文檔簡介
1、目的:
肝素結合性表皮生長因子(heparin-binding epidermal growth factor-like growthfactor,HB-EGF)是表皮生長因子家族的新成員。在細胞中,首先合成的是其前體,鑲嵌于細胞膜上,故稱膜結合型HB-EGF(proHB-EGF)。之后,在特異性去整合素-金屬蛋白酶(a disintegrin and metalloprotease,ADAM)的作用下,proHB-EGF
2、的細胞外域(ectodomain)被切下,脫落成為可溶性的成熟體,即溶解型HB-EGF(sHB-EGF)。sHB-EGF是多種細胞的分裂原,促進細胞增殖。proHB-EGF也具有生物活性,主要為抑制細胞生長、誘導凋亡。ADAM蛋白是一類錨定于細胞膜的細胞表面蛋白家族,ADAM蛋白可能在細胞外基質的水解、細胞-細胞、細胞-基質的粘連、細胞融合及信號轉導等細胞活動中具有重要作用,廣泛參與各種正常的生理活動。在人體,有21種ADAM亞型被發(fā)現(xiàn)
3、,它們的表達存在顯著的組織特異性:其中ADAM2、7、18、19、20、21、30在睪丸特異表達,ADAM8、28在造血細胞特異表達,本實驗在剩余的ADAM亞型(ADAM9、10、11、12、15、17、19、22、23、32、33、ADAMDEC1)中篩選黃體發(fā)育和消退過程中特異性水解膜結合型HB-EGF的ADAM亞型,為人工干預黃體的發(fā)育與消退提供新的靶點。
方法:
取行體外受精-胚胎移植患者的黃素化顆粒
4、細胞,提取顆粒細胞RNA,用Primer 5.0軟件設計各亞型的引物,再用RT-PCR的方法篩選ADAM亞型在顆粒細胞中的表達情況,并通過測序方法進一步驗證。
結果:
RT-PCR方法檢測證實ADAM9和ADAM17在卵巢顆粒細胞中有表達,并且通過測序得到了進一步的證實。
結論:
卵巢顆粒細胞中ADAM基因的表達亞型為ADAM9和ADAM17,推測ADAM9和/或ADAM17可能為
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