苯二氮卓受體高選擇性配體的合成、標記及生物活性評價.pdf

1、中樞和外周苯二氮卓受體是與多種神經(jīng)、精神疾病乃至腫瘤發(fā)生密切相關(guān)的藥靶。至今較少有用于臨床的中樞和外周苯二氮卓受體高選擇性和親和性的放射性配體相關(guān)報道。 本論文詳細地研究了中樞和外周苯二氮卓受體高選擇性和親和性配體的合成、標記及生物活性評價。取得了原創(chuàng)性的研究結(jié)果。 第一，根據(jù)先導化合物中樞苯二氮卓受體BZ1亞型專一性激動劑N,N-二甲基-2-(6-甲基-咪唑并[1，2-a]吡啶)-3-乙酰胺(唑吡坦，Zolpidem)

2、合成中樞苯二氮卓受體BZ1亞型新配體氟代唑吡坦(F-Zolpidem)。Ki值為9.83±1.3nmol/L；半數(shù)抑制常數(shù)IC50值為10.77±2.1nmol/L；KiBZ2/KiBZ1大于31；KiBZ2/KiPBR大于482。氟原子引入保持了Zolpidem的生物活性。 第二，制備了Zolpidem的氟標記物[18F]氟代唑吡坦([18F]-F-Zolpidem)。化學純度和放化純度均大于98％，放化產(chǎn)率為40.8％(未經(jīng)

3、衰減校正)，全部合成時間(包括HPLC分離)約為56分鐘，比活度大于1200mCi/μmol。標記產(chǎn)物室溫穩(wěn)定，親脂性，安全性好，毒性小。 第三，小鼠體內(nèi)藥代動力學研究表明：[18F]F-Zolpidem在體內(nèi)可能是肝腎的代謝途徑，體內(nèi)沒有明顯的脫[18F]氟。 第四，小鼠腦內(nèi)組織分布研究結(jié)果表明：注射[18F]F-Zolpidem后45min，從小腦、前額葉皮質(zhì)、海馬和腦干呈區(qū)域性分布，其中以小腦的放射性濃聚最高，腦干

4、最低，[18F]-F-Zolpidem在小鼠小腦內(nèi)的特異攝取[(T/BS)-1]值達到3.269，注射中樞苯二氮卓受體BZ1亞型專一性配體Zolpidem阻斷后顯著降至0.632(下降80.7％)。放射自顯影結(jié)果顯示45min小腦部位有明顯放射性濃聚，結(jié)果提示[18F]-F-Zolpidem是潛在的中樞苯二氮卓受體BZ1亞型選擇性、特異性PET示蹤劑。 第五，根據(jù)先導化合物外周苯二氮卓受體高親和性配體N,N-二乙基-2-(6-氯

5、-咪唑并[1，2-a]吡啶)-3-乙酰胺(CLINDE)合成了外周苯二氮卓受體新配體CLINDE碘代三氟甲基衍生物(ITFZOL)。Ki值為0.52±0.01nmol/L；半數(shù)抑制常數(shù)IC50值為0.82±0.01nmol/L:KiBZ1/KiPBR大于980，KiBZ2/KiPBR大于1200，三氟甲基的引入提高CLINDE的親和性和選擇性。 第六，制備了用于外周苯二氮卓受體顯像的放射性配體[125/131I]-ITFZOL。

6、用三丁基錫前體，Na125I和雙氧水，不僅具有標記率高(80％以上)、重復(fù)性好及簡單快捷等優(yōu)點，而且標記產(chǎn)物化學純度和放化純度大于98％，比活度高達76GBq/μmol。標記物的體外穩(wěn)定性好，安全，低毒。 第七，在正常和荷瘤小鼠體內(nèi)藥代動力學研究表明：[125I]-ITFZOL在小鼠體內(nèi)可能是肝腎的代謝途徑。[125I]-ITFZOL攝取較高的器官依次為腎上腺、肺、肝、腎和心，其中以腎上腺和肺的攝取最高，這與外周苯二氮卓受體在體

7、內(nèi)的區(qū)域性分布相一致。 第八，小鼠腦內(nèi)組織分布研究結(jié)果表明：注藥后30分鐘，嗅球的放射性濃聚為0.51％ID/g，丘腦最低，嗅球內(nèi)特異攝取值(T/Th)-1為2.32。用外周苯二氮卓受體特異性配體PK11195阻斷后顯著降至0.20(下降61.91％)。大鼠腦放射自顯影30min時可見嗅球及小腦部位放射性濃聚。結(jié)果表明，[125I]-ITFZOL是潛在的外周苯二氮卓受體高親和性、選擇性放射性配體。 第九，裸鼠體內(nèi)組織分布

8、研究結(jié)果表明：[131I]-ITFZOL在腫瘤區(qū)域有一定的放射性濃集，[131I]-ITFZOL可能是外周苯二氮卓受體較合適的SPECT顯像劑，對腫瘤的診斷有潛在的應(yīng)用價值。 本文基于制備高選擇性和親和性的中樞和外周苯二氮卓受體放射性配體，開展了化合物的化學合成，放化合成和體內(nèi)外生物活性等多方面的研究，探討了咪唑并吡啶類化合物對苯二氮卓受體具有高親和性和選擇性的分子機理。拓展了受體顯像新技術(shù)，為促進和完善PET、SPECT在腫瘤