2型糖尿病大鼠心肌微血管內(nèi)皮細胞血管新生功能障礙的體外研究.pdf

1、本文對2型糖尿病大鼠心肌微血管內(nèi)皮細胞血管新生功能障礙進行了研究。文章分為四個部分： 第一部分：取8～9周齡GK大鼠，測定其餐后以及空腹血糖均高于同齡的對照Wistar大鼠，達到T2DM的診斷標準后用作細胞原代培養(yǎng)的取材動物。利用心肌植塊法和主動脈環(huán)種植法培養(yǎng)大鼠心肌微血管內(nèi)皮細胞(MMVEC)和主動脈內(nèi)皮細胞(AEC)。分別用增殖、遷移、黏附和毛細血管管腔樣結(jié)構(gòu)形成實驗來觀察體外MMVEC和AEC的血管新生能力的改變。

2、 第二部分：采用大鼠血管新生特異系列基因芯片觀察促血管新生因子和受體表達譜的改變。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，GK-AEC的大部分促血管新生因子和受體基因無明顯表達變化，而GK-MMVEC的促血管新生因子和受體基因表達有明顯升高。 第三部分：通過體外培養(yǎng)大鼠心肌微血管內(nèi)皮細胞，觀察了高血糖，高FFA單獨存在及這兩者共存時對MMVEC的血管新生能力的影響，探討了游離脂肪酸和高血糖對VEGF及受體表達的作用。 第四部分：利用microRNAs

3、芯片研究GK-MMVEC microRNAs表達譜的改變。發(fā)現(xiàn)表達量上調(diào)2倍的miRNAs分子共11種，包括let-7e，miR-129，miR-291-5p，miR-320，miR-327，mir-333，miR-363-5p，miR-370，miR-494，miR-503，miR-664。通過檢索預測miRNAs靶基因的TargetScan，miRanda,PicTar,TargetScanS四個常用數(shù)據(jù)庫，發(fā)現(xiàn)11種表達上調(diào)的mi