TrkB受體通過(guò)CaMKIV-CREB通路促進(jìn)大鼠海馬神經(jīng)干細(xì)胞增殖的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、目的：研究TrkB受體通過(guò)CaMKIV/CREB通路對(duì)體外培養(yǎng)的大鼠海馬神經(jīng)干細(xì)胞(neural stem cells，NSCs)增殖的促進(jìn)作用。方法在體外分離培養(yǎng)并鑒定的新生大鼠海馬NSCs中，分別用40ng/mlBDNF、用TrkB shRNA慢病毒激動(dòng)或者抑制TrkB受體，用50μMW-7抑制CaM，采用CCK-8法檢測(cè)NSCs增殖情況。在此分組基礎(chǔ)上，用CaMKIVsiRNA抑制CaMKIV，再用免疫共沉淀檢測(cè)CaMKK的絲氨酸

2、／蘇氨酸磷酸化水平，免疫印跡檢測(cè)CaMKIV和CREB磷酸化水平。數(shù)據(jù)以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)誤（means±SE）表示，統(tǒng)計(jì)分析采用單因素方差分析(ANOVA)，或多因素方差分析，多個(gè)實(shí)驗(yàn)組與一個(gè)對(duì)照組比較用最小顯著差法(LSD)，p＜0.05為統(tǒng)計(jì)學(xué)有差異。
　　 結(jié)果：①BDNF組NSCs增殖率明顯高于對(duì)照組(p＜0.05)，且72小時(shí)達(dá)到高峰，而TrkBshRNA慢病毒組NSCs增殖低于對(duì)照組(p＜0.05)：同時(shí)抑制TrkB受體和

3、CaM后，NSCs的增殖進(jìn)一步受到抑制，其細(xì)胞增殖低于慢病毒干擾組(p＜0.05)；②BDNF作用組，CaMKK的絲氨酸／蘇氨酸磷酸化水平、CaMKIV及CREB磷酸化水平均高于TrkBshRNA慢病毒組、W-7組和CaMKIVsiRNA組(p＜0.05)；③W-7組和CaMKIV siRNA組，pCREB和pCaMKIV的表達(dá)低于BDNF組(p＜0.05)。
　　 結(jié)論：①TrkB受體可調(diào)節(jié)NSCs的增殖。②TrkB受體可經(jīng)過(guò)

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