腦膠質瘤中ppENK、EDNRB基因甲基化狀態(tài)及蛋白表達的研究.pdf

1、目的：
　　抑癌基因啟動子區(qū)異常甲基化是表觀遺傳學重要機制之一,在膠質瘤的發(fā)生、發(fā)展中起著重要的作用。術前抽取膠質瘤患者的血清并對抑癌基因ppENK、EDNRB基因啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)進行研究,探討腦膠質瘤血漿中ppENK、EDNRB基因的甲基化狀況與蛋白表達的關系。
　　方法：
　　本組標本來源于2010年11月~2012年7月安徽醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院神經外科手術治療的腦膠質瘤患者,所有標本均經病理確診,術前未進行放療

2、或化療。2例正常腦組織標本來源腦外傷顱內減壓手術患者,作為對照。男21例,女25例,年齡19～76歲,平均38.2歲。按WHO病理分級,Ⅰ~Ⅱ級31例,Ⅲ~Ⅳ級15例。其中星型細胞瘤25例,膠質母細胞瘤13例,少突膠質細胞瘤5例,室管膜瘤3例。標本切除后經液氮冷凍后,置-80℃冰箱保存?zhèn)溆?。檢測46例腦膠質瘤血清標本中ppENK、EDNRB基因啟動子區(qū)CpG島的甲基化狀態(tài),分析其甲基化程度、蛋白表達和臨床資料之間的相關性。
　　結

3、果：
　　本組46例腦膠質瘤標本,經初步檢測有44例DNA質量合格,經nPCR擴增后檢測2種基因對應的擴增后產物,擴增成功的例數(shù)分別為43例、40例。對擴增產物進行甲基化測序,檢測出ppENK甲基化率為44.2％(19/43),EDNRB甲基化率為22.5%(9/40)。2例正常腦組織用以對照膠質瘤組織甲基化的獨特性,并排除可能的非特異性反應,沒有檢測到甲基化現(xiàn)象。按WHO病理分級,在低級別(I-II級)膠質瘤中ppENK基因啟動

4、子甲基化率(33.3%)低于高級別(Ⅲ-IV級)組甲基化率(69.2%)兩者之間存在顯著差別(p<0.05);46例腦膠質瘤患者組織中ppENK、EDNRB甲基化的蛋白表達陽性率分別為57.8%(11/19)、55.5%(5/9),未甲基化的蛋白陽性表達率為87.5%(21/24),90.3%(28/31)。患者年齡、性別、腫瘤病理類型等因素與ppENK、EDNRB基因甲基化無明顯相關。對ppENK、EDNRB基因甲基化狀態(tài)進行Kapl

5、an-Meier生存曲線分析結果顯示:ppENK、EDNRB未甲基化的患者生存期要明顯長于基因甲基化的患者。
　　結論：
　　ppENK、EDNRB基因啟動子區(qū)CpG島中存在甲基化現(xiàn)象,基因啟動子的CpG島的甲基化現(xiàn)象與膠質瘤發(fā)生有關?；蚣谆逝c蛋白表達呈負相關關系,檢測基因啟動子甲基化狀態(tài)及蛋白表達,可能為診斷腦膠質瘤提供一種新的方法;可能成為腦惡性腫瘤基因治療提供重要的理論依據(jù),可能對了解腦膠質瘤患者的預后有重要的意