五黃提取液對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞毒性作用的體外研究.pdf

1、根管治療是牙髓病和根尖周病最完善和最有效的治療方法，根管沖洗作為根管治療的重要環(huán)節(jié)，可有效地去除和抑制感染根管內(nèi)細(xì)菌及其代謝產(chǎn)物。目前，臨床上常用的根管沖洗藥物有3％雙氧水與0.5％～5.25％次氯酸鈉溶液等，上述藥物雖有明顯的抗菌性，但也有較強(qiáng)的細(xì)胞毒性，易對(duì)根尖周組織造成刺激損害。3％雙氧水有氧化、除臭和殺菌作用，但操作不當(dāng)，可引起疼痛，甚至發(fā)生氣腫。次氯酸鈉溶液有組織溶解性[1]，應(yīng)用于根尖孔已破壞或尚未完全形成的牙齒時(shí)，易刺激根

2、尖周組織，影響根尖周病變的愈合。中藥在我國(guó)有著悠久的歷史，因資源豐富，成本較低，應(yīng)用領(lǐng)域日趨廣泛。中藥沖洗劑[2]含多種成分，其抗菌譜廣，殺菌作用強(qiáng)、毒副作用小，日益受到廣大學(xué)者的重視。五倍子富含鞣酸，具有抗病毒、收斂、抗菌等功效，對(duì)內(nèi)氏放線菌[3]及金黃色葡萄球菌[3]有很好的殺滅作用。黃芩具有多種藥理作用，如抗炎、抗氧化、清除自由基等，并對(duì)牙齦卟啉單胞菌[4]及其內(nèi)毒素有很好的抑制作用。目前，五倍子[5]、黃芩已分別被廣泛應(yīng)用于臨床

3、各個(gè)領(lǐng)域，并取得一定成果，但二者的復(fù)合制劑在口腔領(lǐng)域的研究，特別是作為根管沖洗藥物方面的研究，國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)報(bào)道。
　　 目的:
　　 1、研制五倍子、黃芩的提取物復(fù)合制劑——五黃提取液作為一種新型的根管沖洗劑。
　　 2、通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)，研究五黃提取液對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞的毒性作用，與臨床常用的根管沖洗劑——0.5％次氯酸鈉溶液的毒性作用進(jìn)行比較，并觀察去除五黃提取液后人牙周膜成纖維細(xì)胞的恢復(fù)情況，為五黃提取液的臨

4、床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法:
　　 1、分別制備五倍子、黃芩提取物，等比例混合后，用含10％FBS、1％雙抗的DMEM培養(yǎng)液配置成終末濃度為5μg/ml、25μg/ml、50μg/ml、75μg/ml、100μg/ml的五黃提取液。
　　 2、體外培養(yǎng)人牙周膜成纖維細(xì)胞至4～6代，接種于96孔板中，空白對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組、陽(yáng)性對(duì)照組分別加入含10％FBS、1％雙抗的DMEM培養(yǎng)液、5種不同濃度的五黃提取液、0.

5、5％的次氯酸鈉溶液進(jìn)行培養(yǎng)，MTT法測(cè)定細(xì)胞增殖活性及回復(fù)能力[6]。
　　 結(jié)果:
　　 1、五黃提取液濃度為5μg/ml～50μg/ml時(shí)，對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞的增殖有明顯促進(jìn)作用，且五黃提取液濃度為25μg/ml時(shí)作用效應(yīng)最大，與對(duì)照組比較，有顯著性差異（P＜0.05）。五黃提取液濃度為100μg/ml時(shí)，對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞增殖有明顯的抑制作用，與對(duì)照組比較，有顯著性差異(P＜0.05)。臨床常用根管沖洗劑——0

6、.5％次氯酸鈉溶液對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞有明顯的毒性作用，與對(duì)照組及五黃提取液組比較，均有顯著性差異（P＜0.01）。
　　 2、人牙周膜成纖維細(xì)胞加藥培養(yǎng)24h，去除藥物，加培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)72h后，濃度為100μg/ml五黃提取液組與對(duì)照組相比，細(xì)胞數(shù)目無(wú)明顯差異(P＞0.05)，0.5％的次氯酸鈉溶液組細(xì)胞數(shù)目明顯少于對(duì)照組及五黃提取液組，且與二者比較，均有顯著性差異異(P＜0.01）。
　　 結(jié)論:
　　 體