重組腺病毒介導(dǎo)的CD基因及CDglyES融合基因?qū)ewis肺癌放射增敏作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:旨在觀察含CD單基因及CDglyES雙功能融合基因的重組腺病毒(rAdCD及rAdCDglyES)與放射治療聯(lián)合應(yīng)用對(duì)Lewis肺癌小鼠的抑瘤作用,探討含不同基因的重組腺病毒對(duì)放射治療的協(xié)同治療及其對(duì)放療的增敏作用,以期尋找綜合而有效的治療惡性腫瘤的新方法.方法:1首先從該課題組前期構(gòu)建的重組腺病毒rAdCD和pEZZ-18-ES分泌型表達(dá)質(zhì)粒中,用PCR法獲取CD和glyES基因,然后用細(xì)菌重組的方法構(gòu)建含CDglyES融合基因

2、的重組腺病毒質(zhì)粒pAdCDglyES,在293細(xì)胞中擴(kuò)增獲得重組腺病毒rAdCDglyES并在體外證實(shí)融合基因CDglyES中的兩個(gè)基因有獨(dú)自生物學(xué)活性.2用C57BL近交純系小鼠,在其右下肢腓腸肌接種Lewis肺癌細(xì)胞建立小鼠Lewis肺癌動(dòng)物模型.3將荷瘤的C57BL近交純系小鼠隨機(jī)分為8組,即空白組、射線單放組、重組腺病毒rAdCD/5-Fc治療組、rAdCD/5-Fc+放療治療組、rAdCDglyES治療組、rAdCDglyES

3、+放療治療組、rAdCDglyES/5-Fc治療組、rAdCDglyES/5-Fc+放療治療組.4按分組處理后,觀察各組腫瘤的受抑制、生長(zhǎng)延遲、瘤體組織病理學(xué)改變(如壞死、凋亡及微血管數(shù)等)及生存期,并做組間比較.探討重組腺病毒與放療聯(lián)合用于治療惡性腫瘤的協(xié)同作用,重組腺病毒的增敏作用及其機(jī)理.結(jié)論:該研究用同源重組方法成功構(gòu)建了含CD和ES融合基因的重組腺病毒rAdCDglyES,證實(shí)了融合基因表達(dá)產(chǎn)物既有CD活性又有ES活性.有rA

4、dCD、rAdCDglyES進(jìn)行瘤體注射并聯(lián)合前藥5-Fc和放射治療,結(jié)果顯示rAdCD/5-Fc、rAdCDglyES/5-Fc系統(tǒng)對(duì)放射治療都有增敏作用,且rAdCDglyES/5-Fc系統(tǒng)的增敏效果強(qiáng)于rAdCD/5-Fc系統(tǒng).rAdCDglyES瘤體注射治療后對(duì)瘤體組織病理學(xué)的結(jié)果顯示,rAdCDglyES有抑制腫瘤血管生長(zhǎng)的作用.該實(shí)驗(yàn)為詳盡探討rAdCD/5-Fc系統(tǒng)、rAdCDglyEs/5-Fc系統(tǒng)對(duì)放射治療的增敏,以及