GDNF-PROKR1和Proks-PROKRs信號(hào)通路在無神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的:
　　檢測(cè)GDNF/PROKR1和Proks/PROKRs信號(hào)通路相關(guān)蛋白在無神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥狹窄段、擴(kuò)張段組織中的表達(dá)，并探討其與無神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥發(fā)生關(guān)系，揭示其在腸壁神經(jīng)節(jié)細(xì)胞發(fā)生發(fā)展中的重要意義，為無神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥的診斷和治療提供理論依據(jù)。
　　方法:
　　選取2010年1月至2012年3月在天津市兒童醫(yī)院診治的無神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥患兒手術(shù)切除組織標(biāo)本30例，應(yīng)用HE和免疫組化技術(shù)分別檢測(cè)Prok1、Prok2、GDNF

2、、PROKR1、PROKR2、MAPK、AKT在無神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥狹窄段和擴(kuò)張段中的表達(dá)情況;應(yīng)用計(jì)算機(jī)成像系統(tǒng)留取照片，并用圖像分析軟件(Image-Pro-Plus)分別判斷Prok1、Prok2、GDNF、PROKR1、PROKR2、MAPK和AKT在無神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥狹窄段與擴(kuò)張段的腸神經(jīng)節(jié)細(xì)胞和神經(jīng)叢中的表達(dá)情況，所有蛋白的表達(dá)量均用平均光密度值來表示和計(jì)算。
　　結(jié)果:
　　1.Prok1、Prok2在無神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥腸壁

3、狹窄段的肌間及黏膜下神經(jīng)叢中均呈陰性表達(dá);Prok1在擴(kuò)張段神經(jīng)叢中呈陰性表達(dá)，Prok2在擴(kuò)張段神經(jīng)叢的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞中呈陽性表達(dá)。
　　2.PROKR1在無神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥腸壁擴(kuò)張段的肌間及黏膜下神經(jīng)叢的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞中呈強(qiáng)陽性表達(dá)，而在無神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥狹窄段大多表達(dá)呈陰性(92.2)，僅少量呈弱陽性表達(dá)(7.8);PROKR2在無神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥腸壁擴(kuò)張段呈陽性表達(dá)，狹窄段大多表達(dá)陰性(98.5)，僅少量呈弱陽性表達(dá)(1.5)。
　　3

4、.半定量分析:其一，Prok1、Prok2在無神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥狹窄段神經(jīng)叢中平均光密度為(0);Prok1在擴(kuò)張段神經(jīng)叢中平均光密度為(0)，Prok2在擴(kuò)張段中平均光密度為（0.14529±0.057628），Prok2在狹窄段和擴(kuò)張段兩組間表達(dá)存在差異，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。其二，PROKR1在狹窄段神經(jīng)叢中平均光密度為(0.033521±0.012114)，而在擴(kuò)張段神經(jīng)叢中平均光密度為(0.31634±0.108397)，

5、兩組存在差異，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01); PROKR2在擴(kuò)張段神經(jīng)叢中平均光密度為(0.20781±0.087942)，PROKR2在狹窄段神經(jīng)叢中平均光密度為(0.02058±0.00863)，兩組存在差異，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。其三，在擴(kuò)張腸管腸壁神經(jīng)節(jié)細(xì)胞內(nèi)，Prok2分別與PROKR1、PROKR2都存在相同表達(dá)，呈正相關(guān)。其四，PROKR1分別與MAPK、AKT、GDNF都存在相同表達(dá)，呈正相關(guān)。其五，

6、在無神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥擴(kuò)張段腸管腸壁神經(jīng)節(jié)細(xì)胞內(nèi)，PROKR2分別與MAPK、AKT存在相同表達(dá)，呈正相關(guān)。
　　結(jié)論:
　　1.Prok1在無神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥擴(kuò)張段腸壁的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞不存在表達(dá)，說明在成熟的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞或者變異后的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞中沒有表達(dá)，對(duì)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞功能維持無影響;Prok2在無神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥擴(kuò)張段腸壁的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞存在表達(dá)，提示在調(diào)節(jié)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞發(fā)育中發(fā)揮一定作用。
　　2.Prok2分別與PROKR1、PROKR2在無

7、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥擴(kuò)張段腸壁的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞及神經(jīng)纖維中存在同步表達(dá)，說明Prok2通過作用于這兩受體發(fā)揮其調(diào)節(jié)腸神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的發(fā)育。
　　3.PROKR1、PROKR2在無神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥擴(kuò)張段腸壁的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞及神經(jīng)纖維中存在表達(dá)，且與MAPK、AKT、GDNF存在同步表達(dá);提示PROKR1和PROKR2可能通過MAPK/ERK和PI3K/Akt兩條信號(hào)通路參與腸神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的發(fā)育。
　　4.GDNF和PROKR1在無神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥擴(kuò)張段腸壁