miR-135b在肝癌細胞侵襲與轉移中的作用及其分子機制.pdf

1、MicroRNAs(miRNAs)是一類高度保守的小分子單鏈非編碼RNA，具有轉錄后調(diào)控基因表達的功能。我們在肝癌基因組拷貝數(shù)變化區(qū)域篩選到18個miRNA分子，經(jīng)過分析發(fā)現(xiàn)miR-135b拷貝數(shù)擴增且表達量上調(diào)。體外和體內(nèi)實驗顯示 miR-135b能顯著促進肝癌細胞的轉移。進一步實驗發(fā)現(xiàn) miR-135b能抑制細胞與細胞外基質的粘附，增強分泌到細胞外的MMP2(matrix metallopeptidase2)和MMP9(matrix

2、 metallopeptidase9)活性，并且能促進應力纖維的形成。結合mRNA芯片、生物信息學和螢光素酶報告載體系統(tǒng)分析發(fā)現(xiàn)RECK(reversion-inducing-cysteine-rich protein with kazal motifs)和EVI5(ecotropic viral integration site5)是miR-135b的兩個直接靶基因。RECK和EVI5能抑制肝癌的遷移和侵襲。miR-135b通過下調(diào)這

3、兩個靶基因發(fā)揮促進遷移和侵襲的作用。RECK和EVI5在miR-135b抑制細胞與細胞外基質粘附及增強MMP2和MMP9活性的過程都發(fā)揮作用；另外EVI5還可參與 miR-135b促進應力纖維的形成過程。最后，染色質免疫沉淀(ChIP)實驗發(fā)現(xiàn) HSF1能結合在 miR-135b上游引起miR-135b表達上調(diào)。同時，實驗發(fā)現(xiàn) HSF1能促進肝癌細胞的遷移和侵襲，并且這一過程中miR-135b發(fā)揮一定的作用。這些發(fā)現(xiàn)為肝癌轉移提供了新的