組織因子途徑抑制物-1及血栓調(diào)節(jié)蛋白在兔急性肺栓塞血漿中的變化及意義.pdf

1、目的：在急性肺栓寒發(fā)生和發(fā)展過程中，體內(nèi)凝血系統(tǒng)和抗凝血系統(tǒng)都在不斷地發(fā)生變化，作為血栓性疾病的核心“凝血-抗凝血機(jī)制”，需要深入的研究來更加準(zhǔn)確的認(rèn)識(shí)疾病。組織因子是外源性凝血途徑的重要起始因子，在外源性凝血中首先被激活而啟動(dòng)凝血過程，而組織因子途徑抑制物通過與其相互作用在凝血過程中扮演重要角色。血栓調(diào)節(jié)蛋白同樣也參與凝血過程的特定階段，它發(fā)揮作用主要是通過與凝血酶結(jié)合而激活蛋白C，活化的蛋白C通過滅活凝血因子達(dá)到抗凝血作用。組織因子

2、途徑抑制物-1(TFPI-1)及血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)分別作為組織因子抑制物途徑和蛋白C系統(tǒng)的重要抗凝血因子，在體內(nèi)凝血過程中起著重要的作用。
　　 本實(shí)驗(yàn)通過建立急性肺栓塞模型，檢測(cè)TFPI-1和TM在血漿中的變化以探討在急性肺動(dòng)脈栓塞發(fā)生及發(fā)展過程中，TFPI-1及TM的變化趨勢(shì)及其抗凝血途徑在凝血-抗凝血過程中的意義。
　　 方法：選取健康新西蘭大白兔64只，體重2.5～3.5kg，雌雄不拘，隨機(jī)分為8組：(1)對(duì)照

3、組(n=8)，(2)假手術(shù)組(n=8)，(3)栓塞1h組(n=8)，(4)栓寨2h組(n=8)，(5)栓塞4h組(n=8)，(6)栓塞8h組(n=8)，(7)栓塞12h組(n=8)，(8)栓寨24h組(n=8)。首先麻醉實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，用5F穿刺針經(jīng)過右側(cè)頸靜脈穿刺，自針孔內(nèi)置入導(dǎo)絲后退出穿刺針，沿著引導(dǎo)導(dǎo)絲置入6F動(dòng)脈鞘管，經(jīng)鞘管置入5F Berman球囊漂浮導(dǎo)管，通過X線影像觀察，將導(dǎo)管依次通過兔上腔靜脈、右心房、右心室、肺動(dòng)脈，最后達(dá)到

4、左下肺動(dòng)脈。將Berman球囊漂浮導(dǎo)管置于兔左下肺動(dòng)脈開口處后開始允盈球囊，同時(shí)行肺動(dòng)脈造影，如遠(yuǎn)端末觀察劍造影劑顯像，則表明左下肺動(dòng)脈已經(jīng)完全堵塞。兔肺動(dòng)脈模型建立成功。各組動(dòng)物分別于栓塞前、栓塞即刻、栓塞1h、栓塞2h、栓塞4h、栓塞8h、栓塞12h、栓塞24h等時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)肺動(dòng)脈平均壓(PAMP)。各組于試驗(yàn)終點(diǎn)處死動(dòng)物并采取血2ml加入EDTANa2，1mg/ml的抑肽酶500IU/ml的試管中混勻，4℃，3000r/m離心10分

5、，分離血漿，-70℃冰箱保存，待檢TFPI-1、TM的含量。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定血漿中TFPI-1及TM的含量。
　　 結(jié)果：
　　 1、一般情況：對(duì)照組及假于術(shù)組動(dòng)物在麻醉后及于術(shù)過程中呼吸、心率平穩(wěn)，栓塞1h、2h、4h、8h、12h、24h組動(dòng)物在導(dǎo)管栓塞左下肺動(dòng)脈即刻呼吸、心率加快，持續(xù)至試驗(yàn)結(jié)束。
　　 2、血流動(dòng)力學(xué)監(jiān)測(cè)：與對(duì)照組（18.6±2.2375mmHg）相比，假手術(shù)組的PAM

6、P（19.0±2.0627mmHg）未出現(xiàn)明顯變化，栓塞1h(23.4±2.3513mmHg)、2h(20.5±2.2764mmHg)、4h(21.5±1.9569mmHg)、8h(20.9±3.1546mmHg)、12h(24.9±2.7819mmHg)、24h(26.4±3.0468mmHg)組動(dòng)物在栓塞即刻PAMP(26.8±2.9912mmHg)急劇升高，與栓塞前與假手術(shù)組相比出現(xiàn)明顯的升高；至栓塞0.5h(24.9±2.938

7、6mmHg)時(shí)，PAMP水平開始下降，至栓寨1h仍高于栓寨前水平。但與栓塞前相比，栓塞2h、4h、8h組的PAMP水平無明顯差異；而栓塞12、24h組PAMP水平再次升高，并超過栓塞前及假于術(shù)組水平。對(duì)照組與假手術(shù)組在同一時(shí)間點(diǎn)的PAMP水半無明顯的差異。
　　 3、血漿中TFPI-1的變化：與對(duì)照組（35.0963±3.38939）相比，假手術(shù)組（29.6825±2.32808)中TFPI-1的含量降低；對(duì)照組TFPI-1的含

8、量與栓塞1h、2h組（35.0963±4.07658）相比較無明顯差異。栓寨4h(40.5038±4.50859)、8h(42.7775±6.01844)、12h(42.1288±5.29953)、24h（44.4238±3.55682）組的TFPI-1的含量較對(duì)照組高，且呈逐漸升高的局勢(shì)，至栓塞24h組TFPI-1的含量最高。
　　 4、血漿中TM的變化：與對(duì)照組（7.3100±0.23057）相比，假手術(shù)組（7.6125±0

9、.14232）、栓塞1h（7.8938±0.18408）、2h（8.1675±0.42500）、4h(9.2663±0.18408)、8h(9.1875±0.29436)、12h(8.5350±0.22558)、24h（8.2038±0.22557）組血漿中TM的含量升高。栓塞4h組血漿中TM的含量出現(xiàn)高峰，栓塞12h血漿中TM含量逐漸下降，至栓塞24h，TM含量水平仍高于對(duì)照組，回落至2h血漿中的TM水平。
　　 結(jié)論：