過表達VCAM-1對間充質干細胞免疫特性的影響.pdf_第1頁
已閱讀1頁，還剩62頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內容提供方，若內容存在侵權，請進行舉報或認領

文檔簡介

1、目的:克隆小鼠血管細胞粘附分子1(vascular cell adhesionmolecule-1，VCAM-1)cDNA全長，構建綠色熒光蛋白標記的VCAM-1基因逆轉錄病毒載體。探討VCAM-1基因在間充質干細胞(mesenchymal stem cells，MSC)中過表達對細胞免疫學特性的影響，為優(yōu)化MSC的臨床應用提供依據。
　　方法:采用DNA重組技術，將目的基因VCAM-1克隆至含有報告基因EGFP的逆轉錄病毒表達載

2、體MIGR1中;在脂質體介導下，將重組的逆轉錄病毒表達質粒轉染293T細胞，收獲攜帶VCAM-1基因的重組逆轉錄病毒的上清，并感染MSC細胞系C3H10T1/2，熒光顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和感染效率;流式細胞術檢測MSC膜表面的VCAM-1表達情況;3H-TdR摻入法測定過表達VCAM-1的MSC對其免疫學特性的影響。
　　結果:成功構建過表達VCAM-1基因的逆轉錄病毒載體，流式細胞術檢測結果表明VCAM-1在MSC細胞系C3H1

3、0T1/2中穩(wěn)定高表達。
　　進一步，過表達VCAM-1基因的MSC細胞系C3H10T1/2形態(tài)無改變。與轉染空載體的C3H10T1/2相比，過表達VCAM-1的C3H10T1/2對于有絲分裂原誘導的T淋巴細胞增殖抑制作用顯著增強，且這種抑制效應呈劑量依賴性，隨著C3H10T1/2細胞數量的逐漸增加，其抑制效應逐漸增強。當C3H10T1/2與效應細胞比例為1∶10時，轉染了空載體的C3H10T1/2組淋巴細胞增殖活性(cpm值)降

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網頁內容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內容的表現方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容，請與我們聯系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論