靜脈和骨髓間充質(zhì)干細胞輸注對獼猴細胞免疫功能影響的研究.pdf

1、骨髓間充質(zhì)干細胞(BM-MSCs)在許多體外實驗中表現(xiàn)出對異體T淋巴細胞的抑制作用，而T細胞免疫可參與許多疾病的發(fā)生發(fā)展，特別是與異基因干細胞移植后排斥反應、移植物抗宿主病有密切關系，因此MSCs在體外試驗中所表現(xiàn)出的免疫調(diào)節(jié)作用有積極的臨床意義，值得進一步深入研究。 為了探討MSCs在體內(nèi)實驗中對細胞免疫功能的影響，本研究選擇獼猴作為實驗對象，首先分離、培養(yǎng)BM-MSCs，然后將獼猴分為兩組：靜脈輸注MSCs組(Ⅳ組)和髓內(nèi)注

2、射MSCs組(IBM組)，兩組均不做任何其它處理，直接將異體MSCs輸注給受者猴，輸注數(shù)量為4.0×104/kg-2.0×106/kg，通過定期監(jiān)測外周血象、T淋巴細胞亞群、混合淋巴細胞反應(MLR)、體外皮膚移植試驗和TUNEL試驗來判斷MSCs輸注后受者細胞免疫功能的變化，同時考察不同輸注方式和不同輸注數(shù)量對MSCs的細胞免疫調(diào)節(jié)作用的影響。 實驗結(jié)果：異體MSCs輸注后，兩組均未發(fā)生急性毒性反應和移植物抗宿主病(GVHD)

3、表現(xiàn)，外周血象無明顯變化。 在Ⅳ組和IBM組，MSCs異體輸注都可以在一定時間內(nèi)(2周左右)抑制受者T淋巴細胞在MLR中的增殖活性。抑制程度的大小用MLR相對反應值(RR)的變化值(△RR)表示，△RR=RR輸注前—RR輸注后。經(jīng)統(tǒng)計分析，抑制程度與MSCs數(shù)量(4.0×105/kg、1.0×105/kg、2.0×106/kg)呈正相關，這種抑制在IBM組更明顯，P＜0.05。 Ⅳ組中的受者A4及IBM組中的受者B7是兩

4、組中輸注MSCs數(shù)量最多的受者(2.0×106/kg)，分別從輸注后第14天和7天開始，外周血CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+細胞的百分比與輸注前相比有所降低，在輸注后30天左右恢復至輸注前水平；B7比A4外周血T淋巴細胞亞群比例下降持續(xù)的時間長約1周。兩組中其它受者未見類似變化。 Ⅳ組和IBM組中，MSCs異體輸注均可以暫時(20天左右)誘導受者T淋巴細胞對供者及第三者皮膚移植物的非特異性免疫耐受。TUNEL試驗中