米諾環(huán)素抑制急性高眼壓大鼠視網(wǎng)膜星形膠質細胞凋亡的機制研究.pdf

1、分類號UDC博士學位論文密級米諾環(huán)素抑制急性高眼壓大鼠視網(wǎng)膜星形膠質細胞凋亡的機制研究Thestudyofthemechanismofminocyclineinhibitingapoptosisofratretinalastrogliaafteracuteocularhypertension作者姓名：楊曉春學科專業(yè)：臨床醫(yī)學(眼科學)學院(系、所)：湘雅二醫(yī)院指導教師：段宣初教授論文答辯曰期答辯委員會主席一中南大學二O一二年十月博士學位

2、論文中文摘要中文摘要目的：探索急性高眼壓大鼠視網(wǎng)膜星形膠質細胞的凋亡機制，并探討米諾環(huán)素是否可以減少急性高眼壓大鼠視網(wǎng)膜星形膠質細胞的凋亡及其可能的神經保護機制。方法：1160只健康成年雄性SD大鼠隨機分為四組：假手術組、模型組、米諾環(huán)素治療組和PBS治療組，每組40只。通過前房加壓灌注平衡鹽溶液(balancedsaltsolution，BSS)建立SD大鼠急性高眼壓模型。假手術組僅前房灌注BSS而不加壓。米諾環(huán)素治療組大鼠建模后立即

3、給予米諾環(huán)素腹腔注射并連續(xù)給藥3天，PBS治療組則以PBS代替米諾環(huán)素。2術后第1、3、5、7天分批處死大鼠取雙眼眼球行相應指標檢測。免疫組織化學熒光染色分別檢測視網(wǎng)膜小膠質細胞神經營養(yǎng)因子前體蛋白(pronervegrowthfactor，proNGF)的表達和星形膠質細胞p75神經營養(yǎng)因子受體(p75neurotrophinreceptor，p75N1R)的表達，caspase3檢測星形膠質細胞的凋亡，Westernblot檢測視網(wǎng)

4、膜proNGF、神經營養(yǎng)因子(nervegrowthfactor，NGF、)和p75N1R蛋白的表達，RTPCR檢測proNGF和p75N1R基因的表達。結果：1急性高眼壓后大鼠視網(wǎng)膜proNGF和NGF蛋白、NGFmRNA的表達均明顯增加。ProNGF蛋白的增加量較NGF蛋白更顯著。ProNGF蛋白和NGFmRNA在急性高眼壓后第1天即有明顯表達，第3天時達到高峰，第5天開始降低，第7天進一步降低。2急性高眼壓后，視網(wǎng)膜p75N1R蛋

5、白和mRNA的表達在第1天開始增加，第3天為最高，第5天后開始逐漸降低。3急性高眼壓后第3天，視網(wǎng)膜外叢狀層上CDllB和proNGF雙標陽性細胞，神經節(jié)細胞層(ganglioncelllayer，GCL)上GFAP和p75N1R雙標陽性細胞數(shù)量明顯增加。4急性高壓后視網(wǎng)膜GCL層GFAP及caspase3雙標陽性細胞表達明顯。5米諾環(huán)素治療后，急性高眼壓第3天，視網(wǎng)膜proNGF、p75NrR蛋白，NGF、p75N1RmRNA表達明顯