復(fù)方仙貞湯對(duì)絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松婦女平衡能力的影響及其對(duì)成骨細(xì)胞作用的研究.pdf

1、骨質(zhì)疏松癥(osteoporosis，OP)目前已經(jīng)成為最常見的全身性骨代謝疾病之一，因其易合并腕部、腰椎、髖骨等部位的骨折，對(duì)人類、尤其是對(duì)婦女和老年人的健康構(gòu)成了很大的威脅。跌倒是引起骨折的主要原因之一，老年人因?yàn)槠胶饽芰ο陆翟斐傻孤试黾樱o患者帶來(lái)極大傷害。中醫(yī)藥治療骨質(zhì)疏松具有廣闊的前景，復(fù)方仙貞湯對(duì)改善骨質(zhì)疏松癥患者的癥狀和提高骨密度有很好的療效，進(jìn)一步研究其治療骨質(zhì)疏松的作用機(jī)制和改善平衡的能力，定會(huì)為骨質(zhì)疏松的治療提供新

2、的思路。 目的： 1．通過(guò)臨床試驗(yàn)，觀察復(fù)方仙貞湯對(duì)絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松婦女的肌力和平衡能力的影響，以評(píng)價(jià)其預(yù)防跌倒的效果。 2．進(jìn)行細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，用MTT法觀察復(fù)方仙貞湯對(duì)成骨細(xì)胞增殖和用流式細(xì)胞儀檢測(cè)復(fù)方仙貞湯抑制成骨細(xì)胞凋亡的情況，從細(xì)胞分子水平探討其治療骨質(zhì)疏松的作用機(jī)制。 方法： 臨床試驗(yàn)：選擇北京地區(qū)50—80歲之間絕經(jīng)后的骨質(zhì)疏松婦女，采用隨機(jī)對(duì)照的研究方法，分為復(fù)方仙貞湯組、仙靈骨葆組、金爾

3、力(鮭魚降鈣素鼻噴劑)組和單純運(yùn)動(dòng)組。四組均同時(shí)采用運(yùn)動(dòng)療法，即每周三天，每天散步(120步/分)半小時(shí)。治療組加服復(fù)方仙貞湯，每日一劑分兩次水煎服；仙靈骨葆組加服仙靈骨葆膠囊，每次口服2粒，每日三次；金爾力組加用金爾力鼻噴劑，每日一噴，同時(shí)每日服用鈣爾奇D600mg；治療期間均禁止同時(shí)服用雌激素類、雙磷酸鹽等影響骨代謝的藥物，3個(gè)月為1個(gè)療程，治療2個(gè)療程。觀察項(xiàng)目：服藥前后平衡能力測(cè)試(包括平衡木上行走、起立-走、閉服單足站立、強(qiáng)化

4、Romberg測(cè)試)、血清睪酮和雌二醇水平、腰椎及股骨頸的骨密度和腰脊酸痛等各項(xiàng)癥狀。 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)：成骨細(xì)胞系UMR106，用含10％胎牛血清的MEM培養(yǎng)液培養(yǎng)長(zhǎng)滿至單層，消化后調(diào)其濃度為2.0*10<'4>個(gè)/ml，接種于96孔板。再按分組換成含不同濃度(分別為1 mg/L，5 mg/L，10 mg/L，50 mg/L，100 mg/L，500 mg/L，1000 mg/L)復(fù)方仙貞湯的培養(yǎng)液，培養(yǎng)完成后用MTT法檢測(cè)成骨細(xì)胞增

5、殖率。抑制凋亡實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞培養(yǎng)方法同上，接種于六孔板，預(yù)培養(yǎng)后分組加液①空白對(duì)照組：僅加含1O％胎牛血清的MEM培養(yǎng)液②模型組：加濃度為30ng/ml的TNF—α培養(yǎng)液誘導(dǎo)③治療組：都加入濃度為30ng/ml的TNF—α，同時(shí)再分4組分別加不同濃度的復(fù)方仙貞湯培養(yǎng)液(濃度分別為500 mg/L，50 mg/L，1 0 mg/L，1 mg/L)，然后再培養(yǎng)72小時(shí)。消化后收集的細(xì)胞用70％冷乙醇固定和PI單染色，最后上流式細(xì)胞儀檢測(cè)。

6、 結(jié)果： 1．臨床試驗(yàn)： 平衡能力測(cè)定：復(fù)方仙貞湯組的起立一走和強(qiáng)化Romberg試驗(yàn)，療后比療前顯著改善(P<0.05)，其余各組均無(wú)顯著性變化。 骨密度：復(fù)方仙貞湯組的腰椎骨密度，治療后比治療前顯著提高(P<0.0 1)，股骨頸骨密度無(wú)顯著性變化；金爾力組腰椎和股骨頸的骨密度療后比療前均顯著性提高(均P<0.01)；復(fù)方仙貞湯組和金爾力組療后的腰椎骨密度比較無(wú)顯著性差異(P=0.327)；仙靈骨葆組和運(yùn)動(dòng)組

7、的腰椎和股骨頸骨密度療后均無(wú)顯著性變化。 血清睪酮和雌二醇：各組治療前后比較均無(wú)顯著性差異(P>0.05)。 癥狀：四組組問比較有顯著性差異(P<0.01)，但復(fù)方仙貞湯改善腰脊酸痛和全身的癥狀最顯著。 2．細(xì)胞實(shí)驗(yàn)： 復(fù)方仙貞湯可以促成骨細(xì)胞增殖，以50mg／L濃度組促增殖作用最顯著。 復(fù)方仙貞湯能抑制TNF—α誘導(dǎo)的成骨細(xì)胞凋亡，500mg/L濃度組和1mg/L濃度組的凋亡率比模型組顯著性減少

8、(P<0.01)，以1mg/L濃度組抑制作用最佳。 復(fù)方仙貞湯500mg/L、1 0mg/L和1 mg/L濃度干預(yù)的成骨細(xì)胞，處于GO-G1期的顯著性減少(P<0.0 1)；而在S期，所有濃度組的細(xì)胞均較模型組顯著性增加(P<0.0 1)，以500mg/L濃度組最高；在G2-M期，50mg/L和1mg/L濃度組的細(xì)胞均顯著性減少(P<0.0 1和P<0.05)。 結(jié)論： 1．復(fù)方仙貞湯能部分提高絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥患

9、者的動(dòng)態(tài)平衡能力和靜態(tài)平衡能力，初步判斷與提高患者的下肢肌力和改善本體感覺有關(guān)，對(duì)預(yù)防跌倒有一定的作用。 2．復(fù)方仙貞湯能明顯改善骨質(zhì)疏松癥患者的癥狀，并且優(yōu)于其他治療組。 3．復(fù)方仙貞湯可以提高絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松患者的腰椎骨密度，維持股骨頸骨密度。 4．復(fù)方仙貞湯能促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖，與濃度相關(guān)，以較低濃度(50mg/L)作用最明顯。 5．復(fù)方仙貞湯可以抑制TNF—α誘導(dǎo)的成骨細(xì)胞凋亡，與濃度相關(guān)，以低濃度

10、(1 mg/L)抑制作用較好。 6．不同濃度復(fù)方仙貞湯影響的細(xì)胞周期不同，高濃度主要影響GO-G1期和S期，而低濃度對(duì)GO-G1、G2-M、S期均有影響。 創(chuàng)新點(diǎn)： 1．目前對(duì)中醫(yī)與運(yùn)動(dòng)平衡的研究報(bào)道較少，本研究回顧了歷史文獻(xiàn)，闡述了中醫(yī)調(diào)整動(dòng)態(tài)平衡的理論基礎(chǔ)，并通過(guò)臨床試驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)，初步認(rèn)為通過(guò)調(diào)整內(nèi)部陰陽(yáng)臟腑、氣血津液的平衡，可以提高運(yùn)動(dòng)平衡能力。 2．目前骨質(zhì)疏松的研究和治療多著重于骨本身，但本課