染料木黃酮對鼻咽癌細胞的抗腫瘤作用及機制研究.pdf

1、鼻咽癌是發(fā)生于鼻咽部粘膜上皮的一種頭頸部惡性腫瘤，具有顯著的種族、地域差異及多因素病因?qū)W的特點。盡管鼻咽癌在全球的發(fā)病率較低，其在特定人群中為一種地方病。據(jù)統(tǒng)計，鼻咽癌在全世界大部分地區(qū)的發(fā)病率低于百萬分之一，但在我國華南地區(qū)(包括香港)說廣東方言的人群中的發(fā)病率卻超過了百萬分之二十到三十，也因此成為華南地區(qū)最常見的腫瘤之一；而南亞、北極圈、中東和北非地區(qū)的發(fā)病率介于二者之間。強有力的證據(jù)顯示遺傳與環(huán)境因素(如膳食)的交互影響在鼻咽癌發(fā)

2、生發(fā)展中發(fā)揮重要作用。75％的鼻咽癌患者確診時屬于中晚期，同期放化療現(xiàn)已作為Ⅲ期和Ⅳ期鼻咽癌病人的標準療法，聯(lián)合順鉑化療雖提高了早期腫瘤控制率，但仍有部分的早期和多數(shù)晚期腫瘤病人預(yù)后較差。
　　 染料木黃酮(Genistein，又稱金雀異黃素，染料木素)屬于異黃酮類化合物，是大豆異黃酮中活性最強的成分之一，并廣泛分布于其他植物如黃芪、葛根等，具有多種生理及藥理活性。染料木黃酮是帶芳香A環(huán)的三羥基化合物，在分子之相對兩極帶有兩個酚

3、羥基，分子量為270.2，其化學結(jié)構(gòu)和分子量與雌二醇相似，能與雌激素受體低親和地結(jié)合，介導(dǎo)雌激素樣效應(yīng)。近年流行病學調(diào)查研究顯示，豆制品及異黃酮攝入水平與人群某些腫瘤發(fā)生率的降低存在相關(guān)關(guān)系，染料木黃酮的作用因而受到關(guān)注。體外細胞模型和動物實驗已證實染料木黃酮對多種腫瘤(如乳腺癌、前列腺癌、結(jié)腸癌和肝癌)具有化學預(yù)防和抗增殖作用。前述研究發(fā)現(xiàn)，染料木黃酮的抗腫瘤特性包括抑制腫瘤細胞增殖、促進分化以及誘導(dǎo)細胞凋亡。到目前為止，關(guān)于染料木黃

4、酮對鼻咽癌細胞的直接作用尚無報導(dǎo)。
　　 本文旨在研究染料木黃酮對鼻咽癌細胞的生長抑制作用并探索其可能抗腫瘤效應(yīng)的內(nèi)在機制。我們首先采用MTT法檢測染料木黃酮對鼻咽癌細胞增殖的影響，結(jié)果顯示染料木黃酮對CNE-1、CNE-2和C666-1鼻咽癌細胞的生長具有顯著的抑制作用且呈現(xiàn)明顯的時間-和劑量-效應(yīng)關(guān)系，其中160μM染料木黃酮對這三種細胞作用72小時后的生長抑制率分別為66.7％、51.2％和59.7％。對細胞各周期相分布的

5、流式細胞分析術(shù)顯示，染料木黃酮將CNE-2和C666-1細胞阻滯在G2/M期，其對CNE-2細胞的阻滯作用更顯著。30、60、90和120μM染料木黃酮處理CNE-2細胞72小時后，處于G2/M期的細胞分別由8.75％提高至34.95％、84.05％、83.8％和79.6％?；虮磉_芯片和實時定量PCR分析表明，CNE-2細胞經(jīng)染料木黃酮處理后增加了細胞周期素依賴性蛋白激酶抑制劑p21cipl及ATR(Ataxia telangiect

6、asia and Rad3 related)mRNA的表達水平。Western blot檢測顯示染料木黃酮誘導(dǎo)CNE-2細胞p21cipl及ATR蛋白質(zhì)表達水平上調(diào)。基因表達芯片、實時定量PCR以及Western blot結(jié)果還表明，染料木黃酮引起的細胞生長抑制作用同時伴隨著細胞周期素依賴性蛋白激酶抑制劑p15Ink4b的mRNA和蛋白質(zhì)表達水平的顯著升高。此外，選擇性雌激素受體激動劑和拮抗劑對染料木黃酮引起的鼻咽癌細胞生長抑制作用無明