烏斯他丁和環(huán)磷酰胺對(duì)乳腺癌MMP-9表達(dá)與增殖侵襲的影響.pdf

1、第一部分烏斯他丁與環(huán)磷酰胺對(duì)乳腺癌細(xì)胞MCF-7及MDA-MB-231 MMP-9的表達(dá)及增殖侵襲的影響 目的：探討烏斯他丁與環(huán)磷酰胺對(duì)乳腺癌細(xì)胞MCF-7及MDA-MB-231 MMP-9的表達(dá)及增殖侵襲的影響 方法：體外培養(yǎng)的乳腺癌細(xì)胞MCF-7/ MDA-MB-231隨機(jī)分為八組：空白對(duì)照組，烏斯他丁高、中及低劑量組，環(huán)磷酰胺組，烏斯他丁高、中及低劑量組+環(huán)磷酰胺組，采用細(xì)胞計(jì)數(shù)法及噻唑藍(lán)（MTT）法檢測(cè)細(xì)胞的增殖

2、能力；反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）檢測(cè)UTI和CTX對(duì)兩種乳腺癌細(xì)胞MMP-9表達(dá)的影響；通過(guò)Boyden小室侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)該兩種細(xì)胞的浸潤(rùn)能力[1]。 結(jié)果：UTI抑制MCF-7和MDA-MB-231細(xì)胞的增殖，與對(duì)照組細(xì)胞相比，細(xì)胞數(shù)目明顯減低，細(xì)胞增殖下降；能使兩細(xì)胞中MMP-9基因表達(dá)下降，細(xì)胞的增殖侵襲能力降低，通過(guò)與CTX組比較，其抑制作用不如CTX，但CTX與UTI聯(lián)合，其作用優(yōu)于CTX，且UTI聯(lián)合CTX組

3、的細(xì)胞增殖侵襲能力明顯減弱。 結(jié)論：UTI能增強(qiáng)CTX誘導(dǎo)的乳腺癌細(xì)胞MCF-7/ MDA-MB-231增殖抑制作用，且兩者具有協(xié)同效應(yīng)。其機(jī)制可能UTI與降低MMP-9基因的表達(dá)等有關(guān)。 第二部分烏斯他丁和環(huán)磷酰胺對(duì)MCF-7乳腺癌裸鼠中MMP-9表達(dá)和抑制作用 目的：研究烏斯他?。║TI）和環(huán)磷酰胺（CTX）對(duì)MCF-7乳腺癌裸鼠中MMP-9的表達(dá)和抑制作用。 方法：選用尿胰蛋白酶抑制劑烏斯他?。║T

4、I），乳腺癌裸鼠模型：雌性裸鼠40只，接種人乳腺癌細(xì)胞MCF-7，分成生理鹽水組（對(duì)照組）、CTX組、UTI2.5萬(wàn)單位組、UTI5萬(wàn)單位組、UTI10萬(wàn)單位組、CTX+UTI2.5萬(wàn)單位組、CTX+UTI5萬(wàn)單位組及CTX+ UTI10萬(wàn)單位組，每組5只，接種后7天，開始腹腔給藥，接種14天后處死所有裸鼠，統(tǒng)計(jì)皮下平均瘤重，使用免疫組織化學(xué)方法分析MMP-9表達(dá)，用RT-PCR方法檢測(cè)UTI和CTX對(duì)乳腺癌中MMP-9表達(dá)的影響。

5、 結(jié)果：皮下瘤重分別為（7.58±0.57、1.21±0.11*、3.78±0.42*、3.01±0.38*、1.97±0.13*、0.83±0.11*、0.72±0.11*和0.43±0.063*）g，（*與對(duì)照組比較P<0.05），MMP-9蛋白表達(dá)，UTI與CTX組和對(duì)照組比較下降（P<0.05），UTI+CTX組與CTX組比較：蛋白表達(dá)下降（P<0.05），而UTI與CTX組和對(duì)照組比較，MMP-9基因表達(dá)下降（P<0.05