姜黃素通過TGF-β-Smad和TGF-β-ERK途徑對乳腺癌MDA-MB-231細胞MMP-9以及侵襲能力的影響.pdf

1、目的：通過研究姜黃素對轉(zhuǎn)化生長因子-β(Transforming growth factor-β，TGF-β1)誘導的乳腺癌MDA-MB-231細胞內(nèi)基質(zhì)金屬蛋白酶-9(Matrix metallopeptidase-9，MMP-9)表達以及侵襲能力的影響，探討TGF-β/Smad和(或)TGF-β/MAPKs信號通路在姜黃素抑制TGF-β1誘導的乳腺癌侵襲轉(zhuǎn)移中可能存在的作用機制。
　　方法：
　　1.CCK-8法檢測姜黃

2、素對乳腺癌MDA-MB-231細胞的細胞毒性作用。
　　2.侵襲小室觀察姜黃素對TGF-β1誘導的乳腺癌MDA-MB-231細胞內(nèi)的侵襲能力的影響。
　　3.Western blot檢測姜黃素對TGF-β1誘導的MDA-MB-231細胞內(nèi)MMP-9的蛋白表達以及上游Smad2、ERK1/2、p38的磷酸化水平。
　　4.明膠酶譜法檢測姜黃素對TGF-β1誘導的MDA-MB-231細胞上清液中MMP-9的活性變化。

3、>　　5.Western blot和酶譜法檢測姜黃素，ERK特異性抑制劑PD98059，p38特異性抑制劑SB203580對TGF-β1誘導的MDA-MB-231細胞MMP-9蛋白表達及活性變化。
　　結(jié)果：
　　1.CCK-8結(jié)果證實低濃度(≤10μM)姜黃素作用48h內(nèi)，對乳腺癌MDA-MB-231細胞沒有明顯的細胞毒性作用(P>0.05)；濃度大于10μM的姜黃素呈劑量，時間依賴性抑制細胞的生長(P<0.05)。

4、>　　2.侵襲小室檢測顯示姜黃素(≤10μM)呈劑量依賴性明顯減少了TGF-β1誘導的細胞穿膜數(shù)量(P<0.05)。
　　3.Western blot顯示姜黃素(≤10μM)可顯著抑制TGF-β1誘導的MDA-MB-231細胞MMP-9，p-Smad2，p-ERK1/2以及p-p38的蛋白表達，其抑制作用呈濃度，時間依賴性。
　　4.明膠酶譜法結(jié)果表明姜黃素(≤10μM)隨濃度增加對TGF-β1誘導的MMP-9活性的抑制作用