腦脊液細(xì)胞學(xué)及噬菌體生物擴(kuò)增法對(duì)結(jié)核性腦膜炎早期診斷的應(yīng)用研究.pdf

1、背景與目的
　　 結(jié)核病是一種對(duì)人類健康及社會(huì)穩(wěn)定構(gòu)成嚴(yán)重威脅的傳染性疾病。隨著耐藥結(jié)核菌的出現(xiàn)及AIDS的流行和結(jié)核菌的共同感染，結(jié)核成為全球范圍對(duì)人類最具威脅性的感染性疾病之一。據(jù)WHO統(tǒng)計(jì)，全球約1/3的人口感染結(jié)核分枝桿菌(MTB)，每年新增900萬(wàn)，并有300萬(wàn)人死于該病。結(jié)核性腦膜炎(TBM簡(jiǎn)稱結(jié)腦)是常見的由結(jié)核分枝桿菌侵犯中樞神經(jīng)系統(tǒng)造成的感染性疾病，由于結(jié)腦是一種能治愈的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病，在早期階段進(jìn)行特

2、異性的治療是非常有效的，所以其預(yù)后的關(guān)鍵在于早期診斷、及時(shí)治療。羅氏(LowensteinJensen)培養(yǎng)法是目前檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌的公認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)，是確定結(jié)核病診斷和化療方案的重要依據(jù)，也是考核療效，評(píng)價(jià)治療效果的可靠標(biāo)準(zhǔn)。但所需時(shí)間長(zhǎng)(1-2月)，且陽(yáng)性率僅20-30％，不利于指導(dǎo)臨床用藥。常規(guī)涂片抗酸染色雖然快速、便宜，但陽(yáng)性率很低，不能區(qū)分活菌和死菌。核酸擴(kuò)增檢測(cè)方法快速，準(zhǔn)確，但成本高昂，對(duì)實(shí)驗(yàn)室條件要求較高。因此開發(fā)一種快速、準(zhǔn)確

3、的結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)方法是臨床亟待解決的問題，近年來新興起的噬菌體生物擴(kuò)增法(phageamplified biologically assay，PhaB)能快速準(zhǔn)確地檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌，使得結(jié)核病的快速診斷和早期治療成為可能。本研究擬通過腦脊液噬菌體生物擴(kuò)增法檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌聯(lián)合腦脊液細(xì)胞學(xué)動(dòng)態(tài)觀察，對(duì)指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性分析。力圖找出一個(gè)對(duì)結(jié)腦早期診斷有意義的實(shí)驗(yàn)室診斷方法，以期為結(jié)腦的早期診斷提供依據(jù)。探討該方法在結(jié)腦診斷和治療中的臨床應(yīng)用

4、價(jià)值。
　　 材料與方法
　　 病例組(結(jié)腦組)共86例，男52例，女34例，年齡15-82歲，平均39.94±11.19歲；對(duì)照組1(中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染非結(jié)腦組)共40例，男13例，女27例，年齡12-68歲，平均31.96±18.03歲；對(duì)照組2(正常對(duì)照組)共20例，男11例，女9例，年齡9-57歲，平均26.44±12.22歲?；颊哌x取鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院2007-2008年呼吸內(nèi)科、神經(jīng)內(nèi)科門診及住院患者，所有病

5、例均根據(jù)相應(yīng)病史、臨床表現(xiàn)及影像學(xué)、實(shí)驗(yàn)室檢查確診為結(jié)腦。所有病例腰穿后進(jìn)行腦脊液常規(guī)、生化、細(xì)胞學(xué)檢查以及墨汁、抗酸染色并進(jìn)行結(jié)核分枝桿菌快速培養(yǎng)。
　　 結(jié)果：
　　 1.結(jié)腦組腦脊液白細(xì)胞數(shù)增高80例(93.0％)；蛋白增高76例(88.4％)；氯化物降低50例(58.1％)；糖降低52例(60.4％)。對(duì)照組1白細(xì)胞數(shù)增高21例(52.5％)；糖降低8例(20.0％)；蛋白增高15例(37.5％)；氯化物降低9例

6、(22.5％)。對(duì)照組2白細(xì)胞數(shù)增高2例(10.0％)，其他結(jié)果均正常。結(jié)腦組白細(xì)胞數(shù)升高和葡萄糖呈中度下降，生化改變以蛋白質(zhì)明顯升高和氯化物的明顯下降為主，腦脊液常規(guī)及生化檢查是結(jié)腦診斷的基礎(chǔ)。細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)腦組腦脊液呈混合性細(xì)胞反應(yīng)的72例(83.7％)；對(duì)照組1腦脊液呈混合性細(xì)胞反應(yīng)的8例(20％)，對(duì)照組2為正常細(xì)胞學(xué)分類，結(jié)腦患者更易出現(xiàn)混合細(xì)胞反應(yīng)。
　　 2.噬菌體生物擴(kuò)增法檢測(cè)27例結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)陽(yáng)性，陽(yáng)性率31

7、.4％；59例結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)陰性(68.6％)。對(duì)照組1結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)陽(yáng)性5例，陽(yáng)性率12.5％；35例結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)陰性(87.5％)、對(duì)照組2結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)均陰性，與結(jié)腦組比較均有顯著差異(P<0.05)。涂片抗酸染色檢查陽(yáng)性僅4例(4.65％)，陰性82例(95.3％)與結(jié)腦組比較有顯著差異(P<0.05)。用噬菌體法培養(yǎng)能在18-24小時(shí)內(nèi)觀察結(jié)果，縮短結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)時(shí)間。
　　 結(jié)論：
　　 1結(jié)腦組

8、白細(xì)胞數(shù)升高和葡萄糖呈中度下降，生化改變以蛋白質(zhì)明顯升高和氯化物的明顯下降為主，細(xì)胞學(xué)呈混合性細(xì)胞反應(yīng)。
　　 2噬菌體生物擴(kuò)增法與傳統(tǒng)結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)、直接涂片法相比，可以簡(jiǎn)便、快速地檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌，全程只需18-24小時(shí)，并且具有較高的敏感性和特異性，對(duì)結(jié)腦診斷和治療有很好的應(yīng)用價(jià)值。
　　 3在腦脊液細(xì)胞學(xué)的基礎(chǔ)上聯(lián)合噬菌體生物擴(kuò)增法快速培養(yǎng)，對(duì)結(jié)腦的鑒別診斷及病情轉(zhuǎn)歸判斷均有很高的實(shí)用價(jià)值。為結(jié)腦的早期診斷提供