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1、目的:本研究在中醫(yī)辨證論治理論的指導(dǎo)下,應(yīng)用腦出血模型大鼠進(jìn)行研究,觀察加味抵當(dāng)湯對(duì)腦出血急性期大鼠的神經(jīng)行為學(xué)、出血灶內(nèi)血細(xì)胞吸收情況及腦出血大鼠大腦Bax、Bcl-2及Caspase-3的表達(dá)情況的影響及與劑量的關(guān)系,探討加味抵當(dāng)湯治療腦出血急性期的作用機(jī)理。并與清開(kāi)靈作比較,比較出它們之間的優(yōu)劣,從而為用于臨床提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:SD雄性大鼠50只,體重200-250g,按照隨機(jī)區(qū)組法分為5組,分別為正常組、模型組、加
2、味抵當(dāng)湯高劑量治療組、加味抵當(dāng)湯低劑量治療組和清開(kāi)靈對(duì)照組,每組10只。采用立體定向技術(shù)將Ⅶ型膠原酶注入大鼠尾狀核區(qū)制備大鼠大腦內(nèi)出血模型。分別于第二天及第五天觀察其神經(jīng)行為學(xué)變化;正常組和模型組給予灌服生理鹽水、加味抵當(dāng)湯高劑量治療組、加味抵當(dāng)湯低劑量治療組灌服加味抵當(dāng)湯和清開(kāi)靈對(duì)照組灌服清開(kāi)靈,連續(xù)用藥三天。于第五天用內(nèi)灌流固定及取材的方法取出實(shí)驗(yàn)大鼠大腦,取大腦尾狀核做病理切片,然后分別做光鏡和免疫組化檢查。
結(jié)果:(1
3、)成功的制備了大鼠大腦內(nèi)出血模型。(2)大鼠模型制作后第5天三個(gè)治療組(清開(kāi)靈組、抵當(dāng)湯低劑量組、抵當(dāng)湯高劑量組)與模型組相比,神經(jīng)功能評(píng)分明顯較高,統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),但三者之間顯示均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(3)HE染色抵當(dāng)湯高劑量組較清開(kāi)靈組、抵當(dāng)湯低劑量組出血中心區(qū)域明顯變小,邊緣區(qū)域的神經(jīng)細(xì)胞變性壞死也有明顯減少,多數(shù)存活細(xì)胞形態(tài)相對(duì)正常。(4)Bcl-2蛋白表達(dá)三組治療組較模型組明顯提升,統(tǒng)計(jì)結(jié)果
4、顯示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。Bcl-2蛋白的表達(dá)由由低到高依次為清開(kāi)靈組、抵當(dāng)湯低劑量組、抵當(dāng)湯高劑量組,但三者之間顯示均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(5)Bax蛋白表達(dá)清開(kāi)靈組、抵當(dāng)湯低劑量組、抵當(dāng)湯高劑量組三組較模型組明顯降低,但較正常組明顯提升,統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。其三組中,Bax蛋白表達(dá)由低到高依次為抵當(dāng)湯高劑量組、抵當(dāng)湯低劑量組、清開(kāi)靈組,統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示三者之間均均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(6
5、)Caspase-3蛋白表達(dá)清開(kāi)靈組、抵當(dāng)湯低劑量組、抵當(dāng)湯高劑量組三組較正常組明顯提升,統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。抵當(dāng)湯低劑量組、抵當(dāng)湯高劑量組較模型組明顯下降,統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),清開(kāi)靈組較模型組下降,但統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
結(jié)論:加味抵當(dāng)湯對(duì)腦出血急性期有較顯著的治療作用,且療效與劑量有一定的相關(guān)性。其作用機(jī)制可能與抑制大腦的細(xì)胞凋亡有關(guān)。其治療作用較清開(kāi)靈更明
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