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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:通過觀察腦出血(ICH)急性期大鼠腦組織中血腫周圍腫瘤壞死因子α(Tumor necrosis factor,TNF-α)的表達(dá)、血清白細(xì)胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白細(xì)胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的含量及神經(jīng)功能的變化,探討中藥逐痰通絡(luò)湯對(duì)腦出血急性期大鼠損傷的作用及可能機(jī)制。
方法:清潔級(jí)雄性SD大鼠116只,隨機(jī)分為正常對(duì)照組(N組,n=6)、假手術(shù)組(K組,
2、n=30)、模型組(C組,n=40)和給藥組(Z組,n=40),對(duì)照組6只,后3組設(shè)術(shù)后6 h、24h、48 h、72 h、7d共5個(gè)時(shí)間點(diǎn),各時(shí)間點(diǎn)8只大鼠(K組各時(shí)間點(diǎn)6只)。選用大黃、膽南星、地龍、全蝎、天麻、郁金、石菖蒲、天竹黃組成“逐痰通絡(luò)湯”,中藥水煎濃縮為1.15g/ml。采用膠原酶誘導(dǎo)法定位于腦尾狀核建立大鼠腦出血模型,給藥組于造模后6h、24h、48h、72h、7d,5個(gè)時(shí)間點(diǎn)給予逐痰通絡(luò)湯灌胃,(大鼠灌胃量每次1ml
3、,每天2次),假手術(shù)組、模型組給予等量生理鹽水,正常組按常規(guī)飼養(yǎng)。造模后3h待大鼠清醒后采用Bederson[1】6級(jí)5分法進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分,取評(píng)分為1-4級(jí)分的入組。在指定的時(shí)間點(diǎn)神經(jīng)功能評(píng)分后2h(即給藥組灌胃后2h),用3%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉后,直視下行左心室穿刺抽血,制備血清;心臟灌注后斷頭取腦,做標(biāo)本待用。參考Bederson[1】6級(jí)5分法進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分,免疫組化染色SABC法檢測(cè)腦組織中血腫周圍TNF-α的表達(dá),用E
4、LISA法檢測(cè)血清IL-1β、IL-6的含量。
結(jié)果:
①神經(jīng)功能評(píng)分:除假手術(shù)組之外,其余各組大鼠麻醉清醒之后均出現(xiàn)一定程度的神經(jīng)功能缺損癥狀。腦出血后第6h評(píng)分已較高,第1d、2d評(píng)分逐漸上升,第3d評(píng)分達(dá)到高峰,第7d降到最低值。Z組與C組比較,Z組評(píng)分均較低,第6h、1d及2d無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,第3d、7d有差異(P<0.05)。
②腦組織TNF-α陽性表達(dá):TNF-α陽性細(xì)胞胞漿染色呈
5、棕黃色。TNF-α陽性細(xì)胞集中分布在出血區(qū)尾狀核腦組織,在術(shù)后2d大量表達(dá),第3d達(dá)到最高值,第7d明顯下降,但仍高于正常值;K組各時(shí)間點(diǎn)比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;C組與K組比較,6h、第1d無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,第2d、3d及7d均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01);Z組與C組比較,TNF-α值在6h、1d沒有顯著差異,給藥2d后有差異,3d及7d后差異顯著(P<0.01)。
③IL-1β、IL-6測(cè)定結(jié)果:
1、共同點(diǎn):(A)
6、與K組比較,C組IL-1β、IL-6含量在第1d時(shí)開始升高(P<0.05),第2、3d到達(dá)高值(P<0.001),第7d接近正常范圍;(B)給藥后,第2d,Z組IL-1β、IL-6含量較C組明顯下降(P<0.05),第3d,顯著下降(P<0.001)。
2、不同點(diǎn):在C組內(nèi),均與6h時(shí)間點(diǎn)比較,(A)IL-1β的表達(dá),第2d、3d差異顯著(P<0.001),第1d、7d無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;(B)IL-6的表達(dá),第1d即有差異,第
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