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1、目的: 通過觀察急性腦梗塞大鼠梗死后腦組織環(huán)氧合酶(Cyclooxygenase-2,COX-2)、S-100β蛋白的表達(dá)、血清一氧化氮(Nitric oxide,NO)含量及神經(jīng)功能情況,探討逐痰通絡(luò)湯對(duì)急性腦缺血損傷的作用及可能機(jī)制。 方法: 清潔級(jí)雄性SD大鼠72只,隨機(jī)分為假手術(shù)組(n=24)、對(duì)照組(n=24)、藥物組(n=24),每組再分為腦缺血1d、3d、7d、14d組,每組6只。選用大黃、膽南星、
2、郁金、天竹黃、石菖蒲、天麻、地龍、全蝎組成“逐痰通絡(luò)湯”,中藥水煎濃縮為3g/ml,與術(shù)前五天開始灌胃給藥,大鼠給藥的劑量是根據(jù)臨床成人口服劑量換算為大鼠灌胃劑量12g/(kg·d),2次/天,對(duì)照組給予等量生理鹽水,假手術(shù)組自由飲水。應(yīng)用線栓法建立大腦中動(dòng)脈阻塞(MCAO)模型,術(shù)后2小時(shí)待大鼠清醒后采用Bederson6級(jí)5分法進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分,取評(píng)分為1-4分的入組。假手術(shù)組除不插線外,其余步驟同實(shí)驗(yàn)組,評(píng)分一般0分。在指定的時(shí)間
3、點(diǎn)進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分后斷頭取腦,取新鮮的血清,做標(biāo)本待用。參考Bederson6級(jí)5分法進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分,免疫組化染色SABC法檢測(cè)腦組織COX-2的表達(dá)及分布、S-100β的表達(dá),用硝酸還原酶法檢測(cè)血清NO的含量。 結(jié)果: ①神經(jīng)功能評(píng)分:除假手術(shù)組之外,其余各組大鼠在手術(shù)結(jié)束麻醉清醒之后均出現(xiàn)一定程度的神經(jīng)功能缺損癥狀,與假手術(shù)組比,有顯著差異(P<0.01)。梗死后第3天評(píng)分最高,第14天評(píng)分最低,與對(duì)照組比較,藥物
4、組得分較低,其中第7天、14天降低更明顯,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 ②腦組織COX-2陽性表達(dá):COX-2陽性細(xì)胞胞漿染色呈棕色。(1)分布:在腦梗死后Cox-2陽性神經(jīng)元多位于梗死邊緣及其皮層和海馬區(qū),而在梗死中央?yún)^(qū)缺如.在對(duì)側(cè)(正常腦半球)皮層也有少量陽性細(xì)胞表達(dá).(2)COX-2陽性表達(dá)具有一定的時(shí)間性,隨著時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸降低。其在術(shù)后第1天大量表達(dá),第3天表達(dá)仍持續(xù)較高,但較第1天已明顯下降,第7天顯著下降,第
5、14天基本恢復(fù)正常。(3)與假手術(shù)組比較,藥物組及對(duì)照組陽性表達(dá)明顯增多,有顯著差異(P<0.01)。與對(duì)照組相比,藥物組各時(shí)間點(diǎn)COX-2的表達(dá)均減少,其中第1天、3天減少更明顯,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。 ③腦組織S-100β陽性表達(dá):S-100β陽性細(xì)胞細(xì)胞核呈棕色。藥物組、對(duì)照組各時(shí)間點(diǎn)陽性細(xì)胞數(shù)增多,表達(dá)強(qiáng)度增加,在第1天升高,第3天達(dá)高峰,第7天開始下降,第14天基本恢復(fù)正常;與假手術(shù)組比較有顯著差異(P<0.0
6、1)。與對(duì)照組比較,藥物組陽性細(xì)胞表達(dá)強(qiáng)度在各時(shí)間點(diǎn)均較對(duì)照組低,其中第3天、第7天有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。 ④血清一氧化氮含量:術(shù)后血清一氧化氮(NO)濃度在第1天升高,第3天達(dá)高峰,第7天開始下降,第14天基本恢復(fù)正常。與假手術(shù)組相比,對(duì)照組和藥物組表達(dá)明顯升高,有顯著差異(P<0.01)。與對(duì)照組相比,藥物組各時(shí)間點(diǎn)NO水平均減低,其中第3天有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。 結(jié)論: 逐痰通絡(luò)湯對(duì)急性局灶
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