3種方法檢測(cè)乙型肝炎病毒YMDD變異的比較研究及臨床結(jié)果分析.pdf

1、目的:不暇接對(duì)檢測(cè)乙型肝炎病毒(HBV)YMDD變異的3種方法進(jìn)行靈敏度和特異性比較，并結(jié)合患者治療前HBV DNA載量、.ALl'水平及免疫標(biāo)志物和YMDD變異后HBVDNA載量等臨床信息進(jìn)行結(jié)果分析。 方法:分別以熒光定量PCR(FQ-PCR)、通用模板信號(hào)擴(kuò)增(UT-PCR)和聚合酶鏈反應(yīng)微板核酸雜交.酶聯(lián)免疫吸附法(PCRmnh-EIJSA)，對(duì)拉米夫定治療過(guò)程中血清出現(xiàn)HBV DNA由陰轉(zhuǎn)陽(yáng)的52例慢性乙型肝炎患者，

2、進(jìn)行HBVYMDD變異檢測(cè)，比較3種方法的敏感性，并對(duì)3種方法檢測(cè)結(jié)果不一致的標(biāo)本進(jìn)行測(cè)序，比較它們的特異性。同時(shí)將治療前HBV DNA載量、ALT水平、免疫標(biāo)志物及變異后HBV DNA載量與YMDD變異結(jié)果相結(jié)合進(jìn)行綜合分析。 結(jié)果:FQ-PCR、UT-PCR和PCRmnh-ELISA對(duì)YMDD變異的檢出率分別為：53.85％、48.08％、73.07％，經(jīng)兩兩比較，F(xiàn)Q-PCR和IJT-PCR均與PCRrnnh-EIJSA

3、有明顯差異(P<0.05)，而FQ-PCR與UT-PCR無(wú)顯著性差異(P>0.1)。將檢測(cè)結(jié)果不一致的17例標(biāo)本進(jìn)行測(cè)序，F(xiàn)Q-PCR、UT-PCR、PCRmnh-EIJSA與測(cè)序結(jié)果的符合率分別為94.1％、70.6％、29.4％，三者之間差異有顯著性(P<0.005)。52例研究患者中，28例發(fā)生了YMDD變異，其中YIDD 17例，YVDD 7例，YIDD和YVDD混合變異4例。發(fā)生YIDD變異的患者較治療前HBV DNA水平顯著

4、降低(P<0.05)，發(fā)生YVDD變異的患者較治療前HBV DNA水平差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。YVDD變異后的HBVDNA水平與YIDD變異后HBV DNA水平無(wú)顯著性差異(P>0.05)。YMDD變異組治療前的ALT基礎(chǔ)水平高于YMDD野生組治療前水平(P<0.01)，治療前HBV DNA水平及I-IBeAg陽(yáng)性率在變異組和野生組中無(wú)差別(P>0.05)。 結(jié)論:①3種方法比較，F(xiàn)Q-PCR檢測(cè)HBV YMDD變異

5、具有較高的靈敏性和特異性，并能同時(shí)檢測(cè)出野生株和變異株的混合感染，與測(cè)序結(jié)果相符，是診斷I-IBV YMDD變異較好的方法。UT-PCR與PCRmnh-ELISA相比，特異性較好，且能具體檢測(cè)出YVDD、YIDD兩種變異，與測(cè)序結(jié)果符合率較高。以上結(jié)果提示，F(xiàn)Q-PCR和UT-PCR法在檢測(cè)HBV YMDD變異方面優(yōu)于PCRmnh-ELISA法，值得臨床推廣應(yīng)用。②PCRmnh-ELJSA由于操作煩瑣和較高的假陽(yáng)性率，建議在方法學(xué)得以改