3種方法檢測乙型肝炎病毒YMDD變異的比較研究及臨床結果分析.pdf

1、目的:不暇接對檢測乙型肝炎病毒(HBV)YMDD變異的3種方法進行靈敏度和特異性比較，并結合患者治療前HBV DNA載量、.ALl'水平及免疫標志物和YMDD變異后HBVDNA載量等臨床信息進行結果分析。 方法:分別以熒光定量PCR(FQ-PCR)、通用模板信號擴增(UT-PCR)和聚合酶鏈反應微板核酸雜交.酶聯(lián)免疫吸附法(PCRmnh-EIJSA)，對拉米夫定治療過程中血清出現(xiàn)HBV DNA由陰轉陽的52例慢性乙型肝炎患者，

2、進行HBVYMDD變異檢測，比較3種方法的敏感性，并對3種方法檢測結果不一致的標本進行測序，比較它們的特異性。同時將治療前HBV DNA載量、ALT水平、免疫標志物及變異后HBV DNA載量與YMDD變異結果相結合進行綜合分析。 結果:FQ-PCR、UT-PCR和PCRmnh-ELISA對YMDD變異的檢出率分別為：53.85％、48.08％、73.07％，經兩兩比較，F(xiàn)Q-PCR和IJT-PCR均與PCRrnnh-EIJSA

3、有明顯差異(P<0.05)，而FQ-PCR與UT-PCR無顯著性差異(P>0.1)。將檢測結果不一致的17例標本進行測序，F(xiàn)Q-PCR、UT-PCR、PCRmnh-EIJSA與測序結果的符合率分別為94.1％、70.6％、29.4％，三者之間差異有顯著性(P<0.005)。52例研究患者中，28例發(fā)生了YMDD變異，其中YIDD 17例，YVDD 7例，YIDD和YVDD混合變異4例。發(fā)生YIDD變異的患者較治療前HBV DNA水平顯著

4、降低(P<0.05)，發(fā)生YVDD變異的患者較治療前HBV DNA水平差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。YVDD變異后的HBVDNA水平與YIDD變異后HBV DNA水平無顯著性差異(P>0.05)。YMDD變異組治療前的ALT基礎水平高于YMDD野生組治療前水平(P<0.01)，治療前HBV DNA水平及I-IBeAg陽性率在變異組和野生組中無差別(P>0.05)。 結論:①3種方法比較，F(xiàn)Q-PCR檢測HBV YMDD變異

5、具有較高的靈敏性和特異性，并能同時檢測出野生株和變異株的混合感染，與測序結果相符，是診斷I-IBV YMDD變異較好的方法。UT-PCR與PCRmnh-ELISA相比，特異性較好，且能具體檢測出YVDD、YIDD兩種變異，與測序結果符合率較高。以上結果提示，F(xiàn)Q-PCR和UT-PCR法在檢測HBV YMDD變異方面優(yōu)于PCRmnh-ELISA法，值得臨床推廣應用。②PCRmnh-ELJSA由于操作煩瑣和較高的假陽性率，建議在方法學得以改