NUP98-PMX1抑制c-FOS基因的轉(zhuǎn)錄及其機(jī)制的研究.pdf

1、核孔復(fù)合物(nuclearporecomplex，NPC)是存在于細(xì)胞核核膜上的一種很大的蛋白復(fù)合體，它負(fù)責(zé)細(xì)胞核與細(xì)胞漿之間物質(zhì)與信息的交流。核孔復(fù)合物是由一類稱為核孔素(nucleoporin，NUP)的蛋白組成。近年來，在白血病中發(fā)現(xiàn)越來越多的染色體易位累及NUP214和NUP98。除了NUP214-ABL外，所有的累及核孔素的染色體易位形成的融合蛋白都有FG重復(fù)序列。所以，F(xiàn)G重復(fù)序列在核孔素相關(guān)的融合蛋白致白血病中起著重要的作

2、用。通過對(duì)全部已報(bào)道的5例伴有t(1；11)(q23；p15)染色體易位的患者臨床資料的分析，我們發(fā)現(xiàn)NUP98-PMX1融合基因在年齡較大的男性急性髓性白血病(AML)患者中出現(xiàn)的機(jī)率更高，且拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑的應(yīng)用可能與t(1；11)染色體易位的形成相關(guān)。此外，NUP98-PMX1可能與NUP98-HOXA9一樣能夠與BCR-ABL1協(xié)同導(dǎo)致慢性粒細(xì)胞白血病(chronicmyeloidleukemia，CML)進(jìn)入加速或急變期。

3、 為了更好的認(rèn)識(shí)NUP98相關(guān)的融合蛋白的致白血病機(jī)制，我們對(duì)從一例慢性粒細(xì)胞白血病急變患者中克隆的NUP98-PMX1融合基因進(jìn)行了深入的功能學(xué)研究。在細(xì)胞定位實(shí)驗(yàn)中，我們發(fā)現(xiàn)NUP98-PMX1融合蛋白彌散樣分布于細(xì)胞核內(nèi)，這一定位有別于野生型的NUP98或PMX1的定位。在報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)中，我們發(fā)現(xiàn)NUP98-PMX1能顯性負(fù)地抑制PMX1或SRF對(duì)c-FOS的轉(zhuǎn)錄激活作用。隨后，用實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)和免疫蛋白印跡(

4、Westernblot)的方法，我們又證實(shí)了NUP98-PMX1同樣可以抑制細(xì)胞內(nèi)源的c-FOS的表達(dá)。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)組蛋白去乙?；敢种苿?TrichostatinA，TSA)可以抑制NUP98-PMX1的轉(zhuǎn)錄抑制活性。我們還用體外和體內(nèi)蛋白相互作用實(shí)驗(yàn)證實(shí)了MUP98-PMX1的通過其FG結(jié)構(gòu)域與轉(zhuǎn)錄共抑制因子組蛋白去乙酰化酶1(histonedeacetylase1，HDAC1)相互作用。此外，我們還證實(shí)了NUP98-HOXA9