聯(lián)合免疫缺陷病的免疫學(xué)改變和基因突變研究.pdf

1、目的:通過聯(lián)合免疫缺陷病患兒的臨床特征和免疫表型分析，以及相關(guān)免疫分子的表達(dá)變化，探討重癥聯(lián)合免疫缺陷?。⊿CID）和X連鎖高 IgM血癥（XHIGM）的初步篩查方法和診斷程序；并對其相應(yīng)的基因序列進(jìn)行了分析，探討了疾病基因型－表現(xiàn)型的關(guān)系，為我國早期診斷聯(lián)合免疫缺陷病打下了基礎(chǔ)，為臨床開展造血干細(xì)胞移植治療提供了可能，也為將來的基因治療奠定了基礎(chǔ)。 方法：通過詳細(xì)的病史資料分析患兒的臨床特征。應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測患兒外周血淋巴細(xì)

2、胞亞群分布，以及XHIGM患兒活化的CD3+CD8- T淋巴細(xì)胞表面CD40L的表達(dá)水平。運(yùn)用PCR和瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)擴(kuò)增和鑒定CD40L和IL-2Rγc基因的外顯子條帶，并進(jìn)行基因序列分析。 結(jié)果：在14例患兒中，有4例診斷為XHIGM，其中基因診斷了3例，包括缺失突變2例，插入突變1例。4例XHIGM患兒臨床上有反復(fù)口腔潰瘍、持續(xù)性的中性粒細(xì)胞減少癥或關(guān)節(jié)炎等自身免疫表現(xiàn)，均有血清IgG和IgA水平顯著降低，但是IgM僅有

3、3例升高，1例正常，外周血淋巴細(xì)胞亞群分布均正常，CD40L表達(dá)均顯著降低。10例診斷為SCID，8例為X連鎖SCID（XSCID），其中基因診斷了4例，包括錯義突變2例，缺失突變1例，缺失伴插入突變1例。另外2例為非XSCID。10例SCID患兒臨床上有反復(fù)上呼吸道感染、肺炎、鵝口瘡等真菌感染表現(xiàn)或移植物抗宿主反應(yīng)，均有IgG、IgA和IgM水平顯著低下，均有淋巴細(xì)胞絕對計數(shù)顯著降低，8例XSCID患兒B細(xì)胞比例均顯著升高，T細(xì)胞和N

4、K細(xì)胞比例均顯著降低，1例非XSCID患兒B細(xì)胞、T細(xì)胞和NK細(xì)胞比例均顯著降低，1例非XSCID患兒B細(xì)胞和T細(xì)胞比例顯著降低，NK細(xì)胞比例顯著升高，8例患兒均于1歲以內(nèi)死亡。 結(jié)論：對于疑似重癥聯(lián)合免疫缺陷病的男性患兒，根據(jù)早期反復(fù)呼吸或消化系統(tǒng)感染，抗生素治療效果不佳，伴有或不伴有母系家族中有類似疾病表現(xiàn)等臨床特征，結(jié)合各類血清免疫球蛋白水平變化特點和淋巴細(xì)胞絕對計數(shù)，初步可做出診斷，然后再結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)分析外周血淋巴細(xì)胞