中藥成份PA-1脂質(zhì)體制備工藝及其對人黑色素瘤細胞A375的生長抑制作用的初步探討.pdf

1、中藥成份PA-1是五環(huán)三萜類化合物，具有化學(xué)結(jié)構(gòu)簡單，抗腫瘤藥理活性強，作用機制特異，相對分子質(zhì)量較小等特點。有大量文獻報道已經(jīng)證明PA-1對黑色素瘤有抑制作用，但因為其溶解性很差，口服不吸收，做成注射劑或口服制劑存在嚴(yán)重的溶解度問題，這樣就限制了它的臨床應(yīng)用。脂質(zhì)體包裹技術(shù)可以解決脂溶性藥物不易溶于水的難題，可以穩(wěn)定制劑與提高療效，是抗腫瘤藥物的理想載體。
　　 制備PA-1脂質(zhì)體，測定其含量及載藥率，理化性質(zhì)及初步穩(wěn)定性的考

2、察。初步探討PA-1脂質(zhì)體對人黑色素瘤A375的抑制作用。
　　 采用薄膜分散法制備PA-1脂質(zhì)體，通過正交設(shè)計優(yōu)化制備工藝和處方。利用透射電鏡觀察脂質(zhì)體的形態(tài)，用激光粒度儀測定脂質(zhì)體的粒徑，用過濾法測定其含藥量和載藥率。用MTT法測定PA-1脂質(zhì)體對黑色素瘤細胞的生長抑制作用。
　　 通過單因素考察，確定溶劑種類、溶劑用量、成膜水浴溫度、水合介質(zhì)、水浴超聲溫度和緩沖鹽pH值。以載藥率為指標(biāo)，以藥物與磷脂的比例，膽固醇與

3、磷脂的比例、PBS濃度、水浴超聲的時間為四個因素，得出了正交設(shè)計的最優(yōu)組合：藥物與磷脂的比例為1:30、膽固醇與磷脂的比例為1:10、PBS6.8濃度為0.05mol/L、水浴超聲的時間20min。初步考察，從外觀和過氧化值來看，PA-1脂質(zhì)體在4℃和25℃儲存條件下時均不穩(wěn)定。從外觀上看，4℃與25℃條件下放置時，第二天均有明顯變化，粒子變粘，脂質(zhì)體凝聚成團的現(xiàn)象。從過氧化值來看，4℃與25℃條件下放置的脂質(zhì)體所測得的過氧化值隨著天數(shù)

4、的增加先降后升，不穩(wěn)定。因此，需要加入表面活性劑來保持脂質(zhì)體的穩(wěn)定性。通過對幾種表面活性劑的考察，吐溫-80對PA-1脂質(zhì)體的穩(wěn)定性可以起到比較好的效果。PA-1脂質(zhì)體在光鏡下觀察，可以見到脂質(zhì)體呈現(xiàn)布朗運動充滿視野；脂質(zhì)體PA-1脂質(zhì)體經(jīng)透射電鏡觀察，粒徑圓整，平均粒徑為幾百個納米。接下來，我們進行了脂質(zhì)體對黑色素瘤細胞作用的初步探討，結(jié)果表明，隨著給藥濃度的降低，細胞的抑瘤率也呈下降的趨勢，也就是說，黑色素瘤細胞的存活率與PA-1脂

5、質(zhì)體的給藥濃度成反比，并且PA-1脂質(zhì)體對黑色素瘤細胞的作用與PA-1相當(dāng)。
　　 本文用薄膜分散法制備的脂質(zhì)體外觀圓整，粒徑小而均勻。脂質(zhì)體在4℃保存，短期內(nèi)是可以保持比較高的穩(wěn)定性，但是無法達到長期保存的目的，隨著放置時間的延長，穩(wěn)定性逐漸呈下降的趨勢，所以，冷凍干燥將是我們接下來的重點。從對黑色素瘤細胞株的抑瘤率來看，脂質(zhì)體對黑色素瘤細胞株的生長抑制是有效的，說明，將PA-1做成脂質(zhì)體后，解決脂溶性藥物難溶的問題，為它的臨