姜黃揮發(fā)油對(duì)人惡性黑色素瘤細(xì)胞株A375細(xì)胞增殖凋亡的影響及其機(jī)制初步研究.pdf

1、目的：近年研究報(bào)道顯示，姜黃揮發(fā)油對(duì)多種腫瘤細(xì)胞具有抑制作用，能顯著減少腫瘤數(shù)目，縮小瘤體體積，其主要作用于腫瘤早期，還能預(yù)防腫瘤形成。本文研究姜黃揮發(fā)油（turmeric volatile oil，TVO）對(duì)人表皮黑色素瘤A375（以下簡(jiǎn)稱(chēng)A375）細(xì)胞增殖及凋亡的影響，并探討其作用機(jī)制。
　　方法：不同濃度TVO在體外對(duì)A375細(xì)胞的作用。細(xì)胞增殖-毒性檢測(cè)（CCK8）法測(cè)不同濃度TVO（0~160mg/L）在不同時(shí)間段（24

2、h、48h、72h）對(duì)A375細(xì)胞的增殖抑制率；根據(jù)CCK8結(jié)果選取有效最低藥物濃度進(jìn)行實(shí)驗(yàn)：吉姆薩染色，倒置顯微鏡觀(guān)察細(xì)胞凋亡形態(tài)；DNA片段化檢測(cè)細(xì)胞凋亡；流式細(xì)胞術(shù)測(cè)細(xì)胞凋亡率；Western blot檢測(cè)Caspase-3及BIRC7蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果：隨TVO濃度的增加對(duì)A375細(xì)胞生長(zhǎng)具有顯著的抑制增殖作用,CCK-8結(jié)果示濃度為(0、2.5、5、10、20、40、80、160mg/L)TVO,24h抑制率分別為(0

3、、2.5、5、10、20、40、80、160mg/L)TVO,24h抑制率分別為(0.00±0.00、0.015±0.02、0.084±0.02、0.087±0.01、0.096±0、0.087±0.01、0.122±0.03、0.209±0.01);48h(0.00±0.00、0.005±0.00、0.139±0.02、0.160±0.01、0.217±0.03、0.225±0.02、0.246±0.01、0.355±0.01);72

4、h(0.00±0.00、0.323±0.00、0.446±0.01、0.470±0.02、0.479±0.02、0.352±0.01、0.385±0.02、0.441±0.01),與0mg/L相比P＜0.05；TVO誘導(dǎo)A375細(xì)胞凋亡,藥物誘導(dǎo)后細(xì)胞增殖變慢，貼壁性降低，形態(tài)變得不規(guī)則，見(jiàn)核固縮、核碎裂及核溶解，提取DNA凝膠電泳藥物作48h后，可見(jiàn)凋亡典型的DNA梯狀條帶，并隨藥物濃度增加越明顯細(xì)胞核碎裂；流式測(cè)細(xì)胞凋亡率，濃度為0

5、、2.5、5、10mg/L的TVO，A375凋亡率分別為0、12.7、13.6、15.4%，死亡率僅為0.1%；Western blot測(cè)濃度為(0、2.5、5、10mg/L)TVO作用48h后，隨藥物濃度增高，凋亡相關(guān)蛋白Caspase-3、Caspase-1、TNR-α的表達(dá)量逐漸增多，凋亡抑制相關(guān)蛋白BIRC7、TAK1、JNK1、TAB1表達(dá)量逐漸減少，與0mg/L相比P＜0.05。
　　結(jié)論：TVO對(duì)人惡性黑色素瘤細(xì)胞株