顱骨骨折在腦外傷促新骨形成過程中的作用及機制研究.pdf

1、臨床工作中發(fā)現(xiàn)伴有腦外傷的骨折病人，其骨痂生長明顯增多加快，甚至在某些關節(jié)周圍出現(xiàn)異位骨化。關于此現(xiàn)象國內(nèi)外均有臨床報道和基礎研究，提出了很多假說，但其中機制迄今仍不明朗。目前提出的機制多數(shù)是針對腦外傷后是否會導致腦組織內(nèi)某些成份釋放入血液系統(tǒng)促進新骨形成，但沒有關于顱骨骨折是否會引起顱骨中的某些成分進入血液系統(tǒng)促進新骨形成的研究和報道。 目的： 探討顱骨骨折在腦外傷促新骨形成過程中的作用；研究顱骨骨折伴股骨骨折組大鼠血

2、漿對骨髓間質(zhì)細胞的作用；研究顱骨移植對骨折愈合的影響作用；研究IGFBP-5在顱骨組織中的表達情況，及其對骨髓間質(zhì)細胞的作用。 方法： 研究分以下幾個部分進行： 1．建立實驗動物模型，比較顱骨骨折伴股骨骨折、腦外傷伴股骨骨折及單純股骨骨折后骨折愈合的情況。 2．進行大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的分離、培養(yǎng)、純化及鑒定。 3．比較顱骨骨折組血漿、腦外傷組血漿及單純骨折組血漿對大鼠骨髓間充質(zhì)細胞增殖、分化及礦

3、化功能的影響；比較顱骨浸泡液、髂骨浸泡液對大鼠骨髓間充質(zhì)細胞增殖、分化及礦化功能的影響。 4．研究IGFBP-5在顱骨、髂骨及股骨中的表達，比較不同濃度IGFBP-5對大鼠骨髓間充質(zhì)細胞增殖、分化及礦化功能的影響；去除腦外傷組血漿中的IGFBP-5，比較其與未處理腦外傷組血漿對大鼠骨髓間充質(zhì)細胞增殖、分化及礦化功能的影響。 結果： 1．通過建立腦外傷、顱骨骨折及股骨骨折動物模型，實驗結果顯示術后4周顱骨骨折組生成

4、骨痂體積比單純骨折組骨痂大(P＜0.05)，但小于腦外傷組(P＜0.05)；骨折斷端骨密度檢測結果顯示顱骨骨折組與顱腦損傷組無明顯差異(P＞0.05)，但兩組都低于單純骨折組(P＜0.05)；組織形態(tài)學HE染色顯示顱骨骨折組與腦外傷組類似，但不同與單純骨折組。 2．采用密度梯度離心法和貼壁篩選法相結合，利用Ficoll分離液能有效地將大部分造血細胞和單個核細胞分離開來，再經(jīng)過體外貼壁培養(yǎng)，去除懸浮生長的造血系細胞，所獲得的BMS

5、Cs純度高且活性強。 3．顱骨移植組骨痂體積明顯大于髂骨移植(P＜0.05)和單純骨折組(P＜0.05)。骨折斷端骨密度檢測結果顯示顱骨移植組低于單純骨折組及髂骨移植組(P＜0.05)；組織形態(tài)學HE染色顯示顱骨移植組不同于髂骨移植組和單純骨折組； CBF+F血漿組細胞在增殖、向成骨細胞分化及促進鈣結節(jié)生成能力均較F組血漿培養(yǎng)組強，二者比較有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)，但較TBI+F動物血漿培養(yǎng)組數(shù)量差，二者比較有統(tǒng)計

6、學差異(P＜0.05)；顱骨浸泡液在增殖、向成骨細胞分化及促進鈣結節(jié)生成能力三方面均較髂骨浸泡液強(P＜0.05)。 4．各骨折組動物模型血漿中IGFBP-5濃度于骨折后第8小時達到高峰，此后逐漸減低，至術后第5天時，各組血漿IGFBP-5濃度與正常組血漿無差別。骨折后8小時CBF+F組血漿IGFBP-5濃度是單純骨折組血漿IGFBP-5濃度的2.83倍，是正常大鼠血漿IGFBP-5濃度的3.12倍。 結論： 1