重組人骨保護(hù)蛋白治療多發(fā)性骨髓瘤骨病的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、多發(fā)性骨髓瘤(MM)以骨髓中出現(xiàn)無(wú)限擴(kuò)增的異常漿細(xì)胞為主要病理特征。其突出的臨床特點(diǎn)之一就是進(jìn)行性的骨質(zhì)破壞引起的骨髓瘤骨病，包括溶骨性骨破壞、病理性骨折、高鈣血癥和彌漫性骨質(zhì)疏松。MM骨病的主要原因是破骨細(xì)胞活性增強(qiáng)，而不伴有相應(yīng)的成骨細(xì)胞活性的增加，導(dǎo)致骨吸收增加。漿細(xì)胞與骨髓微環(huán)境的相互作用是破骨細(xì)胞激活的關(guān)鍵。 最近的研究證實(shí)RANKL/RANK/OPG系統(tǒng)是調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞(OC)形成和功能的關(guān)鍵。RANKL主要表達(dá)于骨髓

2、微環(huán)境中的基質(zhì)細(xì)胞和成骨細(xì)胞。RANKL與RANK在破骨細(xì)胞分化和骨吸收方面起關(guān)鍵性調(diào)節(jié)作用。破骨細(xì)胞前體細(xì)胞和破骨細(xì)胞表面RANK分子一旦與RANKL結(jié)合，其分化、擴(kuò)增明顯加快，活性明顯增強(qiáng)。OPG是一種誘騙受體，與RANKL結(jié)合后，可以阻斷RANKL與RANK結(jié)合，抑制OC的分化與成熟。 在與成骨細(xì)胞前體或骨髓基質(zhì)細(xì)胞共同培養(yǎng)時(shí)，骨髓瘤細(xì)胞可以上調(diào)RANKL表達(dá)，并下調(diào)OPG表達(dá)。骨髓活組織檢查證實(shí)RANKL表達(dá)增高，可能是

3、因?yàn)楣撬杌|(zhì)細(xì)胞，成骨細(xì)胞和激活的T淋巴細(xì)胞過(guò)度表達(dá)RANKL所致。就骨髓瘤細(xì)胞是否能夠直接表達(dá)RANKL，目前還有爭(zhēng)論：一些研究者認(rèn)為MM細(xì)胞本身不能直接表達(dá)RANKL，也不能產(chǎn)生sRANKL。此外，微陣列技術(shù)技術(shù)并不能檢測(cè)到骨髓瘤細(xì)胞上有RANKL基因表達(dá)。然而，其他研究結(jié)果卻表明MM細(xì)胞能夠直接表達(dá)RANKL。 在體外實(shí)驗(yàn)中，本課題通過(guò)建立小鼠骨髓瘤細(xì)胞系SP2/0與破骨細(xì)胞前體細(xì)胞RAW264.7混合培養(yǎng)體系來(lái)探討骨髓瘤

4、骨病的發(fā)病機(jī)制，結(jié)果表明：新的混合培養(yǎng)體系不需要特殊的誘導(dǎo)劑就可以誘導(dǎo)破骨細(xì)胞前體分化為成熟的破骨細(xì)胞。應(yīng)用重組人骨保護(hù)蛋白rhOPG-Fc可以抑制破骨細(xì)胞前體細(xì)胞分化，有效地抑制成熟破骨細(xì)胞的骨吸收功能。間接證明了小鼠骨髓瘤細(xì)胞系SP2/0能夠分泌RANKL。 在骨髓瘤動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，本研究通過(guò)隨機(jī)分組對(duì)照，測(cè)量了血、尿骨轉(zhuǎn)換生化指標(biāo)、DXA骨密度和CT值骨量測(cè)定、腰椎和股骨生物力學(xué)檢測(cè)、病理組織形態(tài)學(xué)及骨形態(tài)計(jì)量學(xué)測(cè)定，結(jié)果顯示

5、應(yīng)用rhOPG-Fc可有效抑制骨髓瘤小鼠的骨丟失。藥物的治療效果與用藥時(shí)間及劑量有關(guān)。理想的用藥方式應(yīng)該是用藥持續(xù)時(shí)間2周，用藥劑量為6mg/kg/d。 總的來(lái)說(shuō)，本研究表明：骨髓瘤細(xì)胞能夠分泌RANKL，進(jìn)而直接誘導(dǎo)破骨細(xì)胞前體分化為成熟的破骨細(xì)胞。這一誘導(dǎo)作用可以被rhOPG-FC抑制。rhOPG-Fc能夠改善骨髓瘤小鼠的溶骨性骨病。而且藥物的治療效果與用藥時(shí)間及劑量有依賴關(guān)系。理想的用藥時(shí)間為2周，用藥劑量為6mg/kg/