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文檔簡介
1、目的:觀察中藥復(fù)方制劑腎康注射液對高糖培養(yǎng)大鼠腎小球系膜細(xì)胞周期異常的調(diào)節(jié)作用及其機(jī)制,探討腎康注射液對早期DN的防治作用.方法:將體外培養(yǎng)的正常大鼠小球系膜細(xì)胞分為7組,分別為正常組、高糖組、甘露醇組、苯那普利組和不同劑量腎康注射液治療組,每組設(shè)3個復(fù)孔,共培養(yǎng)72小時.應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)觀察細(xì)胞周期分布、RNA/DNA比值、細(xì)胞大小;ELISA法測定培養(yǎng)細(xì)胞上清液中FN的含量;RT-PCR檢測各組細(xì)胞TGF-β<,1>mRNA、P<'2
2、1>mRNA的表達(dá).結(jié)果:(1)高糖培養(yǎng)腎小球系膜細(xì)胞周期分布異常,G<,1>期細(xì)胞比例增高,G<,2>期、S期比例下降,RNA/DNA比值增高,以及細(xì)胞體積增大;腎康注射液高劑量組可以使細(xì)胞周期分布、RNA/DNA比值趨于正常,并能抑制細(xì)胞體積增大.(2)高糖培養(yǎng)系膜細(xì)胞FN合成及分泌增多,腎康注射液高劑量組能抑制FN的過度合成及分泌.(3)高糖培養(yǎng)系膜細(xì)胞TGF-β<,1>mRNA、P<'21>mRNA表達(dá)增加,腎康注射液可以抑制T
3、GF-β<,1>mRNA、P<'21>mRNA過度表達(dá),高劑量組作用優(yōu)于苯那普利.結(jié)論:(1)高糖培養(yǎng)腎小球系膜細(xì)胞出現(xiàn)細(xì)胞周期異常改變,表現(xiàn)為細(xì)胞停滯在G<,1>期,細(xì)胞肥大,FN合成及分泌增多;腎康注射液可以改善細(xì)胞周期異常改變,促使細(xì)胞周期正常運(yùn)轉(zhuǎn),肥大減輕,FN異常合成及分泌減少.(2)腎康注射液在轉(zhuǎn)錄水平影響系膜細(xì)胞TGF-β<,1>以及P<'21>合成,從而促使細(xì)胞周期正常運(yùn)轉(zhuǎn),可能是腎康注射液調(diào)節(jié)高糖培養(yǎng)腎小球系膜細(xì)胞周期
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