遲發(fā)性卟啉病2家系UROD基因突變分析.pdf

1、遲發(fā)性皮膚卟啉?。╬orphyria cutanea tarda，PCT）是一種少見的卟啉代謝異常的常染色體顯性遺傳病，臨床特征為日光暴露部位皮膚的光毒性反應及脆性增加。UROD基因為該病的致病基因，位于染色體1p34。目前已報道的UROD基因突變有109個，各外顯子均有突變報道。
　　目的：對兩個遲發(fā)性皮膚卟啉病家系進行基因篩查，選取尿卟啉原脫羧酶（UROD）基因進行研究，探討以上兩個家系的分子病因。
　　方法：收集2個遲

2、發(fā)性皮膚卟啉病家系的外周血標本，制備基因組 DNA，采用聚合酶鏈反應（PCR）擴增UROD基因的10個外顯子及鄰近內(nèi)含子區(qū)域，對PCR產(chǎn)物進行直接測序，將測序結(jié)果與Genebank中UROD基因的標準序列（Gene ID:7389）進行比對，分析該基因的突變。
　　結(jié)果：在UROD基因10個外顯子及鄰近內(nèi)含子區(qū)域內(nèi)檢測到7個變異位點。發(fā)現(xiàn)UROD基因的2480位堿基T＞A（rs2236576）,該堿基位于第1號外顯子上游區(qū)域；第3

3、238位堿基 C＞T（rs12749939），該堿基位于第1、2號外顯子之間的內(nèi)含子區(qū)域；第4577位堿基G＞T（rs11211066）,第4679位堿基G＞T（rs6698485），上述兩個堿基位于第6、7號外顯子之間的內(nèi)含子區(qū)域；第5538位堿基C＞T（rs6429553），第5634位堿基 T＞C（rs13948），上述兩個堿基位于第9、10號外顯子之間的內(nèi)含子區(qū)域;以上6個位點均不編碼氨基酸。第5913位堿基G＞A，使第384位

4、氨基酸密碼子GAA→AAA，由谷氨酸（Glu）轉(zhuǎn)變?yōu)橘嚢彼幔↙ys），該堿基位于第10號外顯子上。以上7個變異在2個PCT家系患者及正常人中均有出現(xiàn)，為單核苷酸多態(tài)性（Single Nucleotide Polymorphism，SNP），不是引起上述兩個遲發(fā)性卟啉病家系的致病突變。
　　結(jié)論：在UROD基因編碼區(qū)域及附近內(nèi)含子發(fā)現(xiàn)7個變異位點，而這些變異不是上述兩個遲發(fā)性卟啉病家系的致病性基因突變，具體病因還需要在UROD基因外