禽腦脊髓炎病毒分離株全基因序列的測(cè)定及VP1蛋白表達(dá).pdf

1、本研究根據(jù)Calnek疫苗株序列設(shè)計(jì)了31條引物，利用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，對(duì)我國(guó)AEV分離株L2Z株的全基因組核苷酸序列進(jìn)行了測(cè)定，同時(shí)，采用Bac-to-Bac系統(tǒng)在昆蟲(chóng)Sf9細(xì)胞中成功表達(dá)了AEVVP1基因，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下： 對(duì)我國(guó)AEV分離株L2Z株的全基因組核苷酸序列測(cè)定的結(jié)果表明：該病毒株基因組全長(zhǎng)為7059個(gè)核苷酸殘基，包括494個(gè)核苷酸殘基的5’非編碼區(qū)、6402個(gè)核苷酸殘基的開(kāi)放閱讀框和136個(gè)核苷酸殘基的3

2、’非編碼區(qū)及poly(A)尾巴。與已發(fā)表的AEV疫苗株1143的基因組序列比較發(fā)現(xiàn)，它們之間核苷酸和氨基酸的同源性分別為98％和97.6％，與雞胚適應(yīng)株VR的基因組序列比較核苷酸和氨基酸的同源性分別為93.9％和96.4％。結(jié)構(gòu)蛋白(VP1-VP4)中，主要宿主保護(hù)性免疫原蛋白VP1氨基酸之間差異較小，L2Z株與疫苗株和雞胚適應(yīng)株VP1基因的氨基酸同源性分別為99.3％和98.5％。 重組Bacmid-VP1轉(zhuǎn)染昆蟲(chóng)細(xì)胞Sf9后