兩株狂犬病重組疫苗株劑量依賴反應及對強毒的攻毒保護研究.pdf

1、狂犬病(Rabies)是由狂犬病病毒(Rabies virus，RABV)引起的，能侵入人和動物神經(jīng)系統(tǒng)，一旦發(fā)病致死率高達100％的重要人獸共患病。每年全世界因狂犬病死亡的人數(shù)就高達5.9萬人，由于經(jīng)濟條件和基礎設施的落后，其中超過95％的死亡病例發(fā)生在亞洲和非洲。我國是僅次于印度受狂犬病威脅最為嚴重的國家之一，在我國每年約有2，400人感染狂犬病，居民生命財產(chǎn)安全受到嚴重威脅。由于大多數(shù)人間狂犬病病例都是由受感染的犬貓咬傷或抓傷所致

2、，目前疫苗接種又是控制和切斷犬狂犬病傳播的最有效途徑。因此研制安全高效，成本低廉且易于使用的狂犬病疫苗具有重要意義。
　　本研究以狂犬病毒G蛋白333位點精氨酸突變?yōu)楣劝彼岬腅RA疫苗株(rERAG333E)和表達狂犬病病毒G蛋白重組新城疫活載體疫苗株(rcLa-RVG)為研究對象，在小鼠上對兩株疫苗不同免疫劑量的有效性和抗體持續(xù)期進行了摸索，并全面評價了兩株重組疫苗對狂犬病經(jīng)典強毒株和現(xiàn)地流行強毒株的保護效率。
　　分子修

3、飾疫苗株rERAG333E以103～106 FFU/mL的劑量經(jīng)過口服途徑免疫小鼠后進行血清中和抗體檢測，檢測各免疫劑量中和抗體誘導情況以及中和抗體持續(xù)期;同時在免疫4周后，對不同劑量免疫小鼠分別進行經(jīng)典毒株CVS-24和不同基因型現(xiàn)地流行毒株GX/09和MRV的攻毒保護實驗。實驗結(jié)果表明，rERAG333E以104、105、106 FFU/mL劑量免疫小鼠，免疫后各實驗組小鼠均能產(chǎn)生較高的抗RABV中和抗體，且能夠抵抗經(jīng)典攻擊毒株CV

4、S-24攻擊，保護率達到100％;免疫有效持續(xù)期能達到24周以上，無明顯的劑量依賴性;以≥104 FFU/mL劑量的rERAG333E口服免疫小鼠同樣能有效抵抗南方流行代表株GX/09和北方流行代表毒株MRV的致死性攻擊。
　　重組疫苗株rcLa-RVG以1045～1075 EID50/0.1 mL的劑量通過肌肉注射方式免疫小鼠后進行血清中和抗體檢測，可以誘導小鼠產(chǎn)生顯著的抗RABV的中和抗體水平，中和抗體持續(xù)期達到40周以上，并

5、且1075 EID50/0.1 mL和1065 EID50/0.1 mL劑量免疫組平均中和抗體水平為3.9 IU/mL和2.6 IU/mL;以1045～1075 EID50/0.1 mL各免疫組的小鼠免疫3周后分別用經(jīng)典攻擊毒株和不同現(xiàn)地流行狂犬病強毒進行攻毒保護實驗，1075 EID50/0.1 mL劑量組能夠100％抵抗GX/09，MRV，CVS-24致死性攻擊;1065 EID50/0.1 mL劑量組對GX/09，MRV，CVS-

6、24致死性攻擊保護率為80％;1055 EID50/0.1 mL劑量組對GX/09保護率為40％，對MRV和CVS-24保護率均為80％;1045EID50/0.1 mL劑量免疫組對GX/09和CVS-24致死性攻擊保護率均為80％，對MRV保護率為40％;上述研究表明rcLa-RVG以1075 EID50/0.1 mL劑量免疫小鼠以后能對現(xiàn)地流行毒株產(chǎn)生完全的保護力。
　　本研究結(jié)果表明，分子修飾疫苗株rERAG333E和重組活