miR-141與膀胱癌預(yù)后相關(guān)性及藥物對(duì)膀胱癌葡萄糖代謝影響.pdf

1、本文主要從以下幾個(gè)方面進(jìn)行了論述：
　　第一部分 miR-141與膀胱癌診斷預(yù)后相關(guān)性研究
　　目的:分析微小RNA-141(miR-141)與膀胱癌臨床病理分期相關(guān)性及評(píng)估m(xù)iR-141預(yù)測膀胱癌預(yù)后價(jià)值。
　　方法:選取114例膀胱癌患者癌腫及癌旁正常組織，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測miR-141并與患者臨床病理分期及隨訪數(shù)據(jù)進(jìn)行相關(guān)性分析。比較腫瘤組織和癌旁組織中miR-141表達(dá)水平差異，miR-141表達(dá)

2、與腫瘤分級(jí)、是否肌層浸潤間關(guān)系采取t檢驗(yàn)。miR-141表達(dá)和腫瘤分期間相關(guān)性分析采取單因素方差分析。miR-141和腫瘤特異性生存間相關(guān)性采取log-rank檢驗(yàn)和Cox回歸分析，同時(shí)將腫瘤分期、分級(jí)、患者性別進(jìn)行多變量方差分析。
　　結(jié)果:顯示膀胱癌組織中miR-141表達(dá)增高，并與腫瘤分級(jí)(P＜0.001)、分期(P＜0.001)、侵襲性(P＜0.001)相關(guān)。Log-rank檢驗(yàn)顯示高miR-141表達(dá)和膀胱癌患者較長無病

3、生存期呈相關(guān)性(P＜0.001)，同時(shí)使用單變量分析和COX回歸分析得到證實(shí)(P＜0.001 and P=0.039)。對(duì)于非肌層浸潤性膀胱癌患者，單因素log-rank和COX分析顯示高miR-141表達(dá)和無病生存期相關(guān)I(P=0.031，P=0.040)，亦和疾病特異性生存相關(guān)(P=0.028，P=0.038)，同時(shí)使用多因素COX分析亦得到證實(shí)(P=0.036，P=0.042)。
　　結(jié)論:miR-141與膀胱癌進(jìn)展相關(guān)，其

4、表達(dá)增高成為膀胱癌預(yù)后良好獨(dú)立預(yù)測指標(biāo)。表明miR-141可成為膀胱癌危險(xiǎn)分層的潛在生物學(xué)指標(biāo)。
　　第二部分唑來膦酸在膀胱癌葡萄糖代謝中作用機(jī)制研究
　　目的:研究唑來膦酸對(duì)膀胱癌細(xì)胞生長和葡萄糖代謝的影響。方法:比較唑來膦酸干預(yù)前后膀胱癌細(xì)胞生長、葡萄糖的攝入和NADPH產(chǎn)生的差異，定量RT-PCR結(jié)合western blot檢測TAp73和葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)表達(dá)差異;通過建立TAp73過表達(dá)的膀胱癌細(xì)胞

5、系，驗(yàn)證唑來膦酸對(duì)磷酸戊糖途徑的抑制作用是否在TAp73過表達(dá)的情況下有所改變;以Ras抑制劑替代唑來膦酸處理膀胱癌細(xì)胞，western blot檢測Ras活性，TAp73和G6PD的表達(dá)，檢測細(xì)胞葡萄糖的攝入和NADPH產(chǎn)生的差異;敲除TAp73后，檢測G6PD的表達(dá)、葡萄糖攝取和細(xì)胞增殖水平。
　　結(jié)果:唑來膦酸在膀胱癌細(xì)胞中能夠抑制細(xì)胞增殖和磷酸戊糖途徑(PPP)、G6PD。此外，唑來膦酸處理后，TAp73穩(wěn)定性、Ras-G