沙門菌快速檢測(cè)顯色培養(yǎng)基的研制與應(yīng)用.pdf

1、背景及目的:
　　 沙門菌（Salmonella）是一種主要的人畜共患病原菌，在自然界中分布廣泛，對(duì)人類和動(dòng)物均具有極大危害。在全世界的細(xì)菌性食物中毒病例中，沙門菌所引起的中毒例數(shù)明顯多于其它細(xì)菌，是我國(guó)乃至世界上細(xì)菌性腹瀉最主要的病原菌之一，是引起食源性疾病的首要因素。按照國(guó)際慣例，應(yīng)將易被沙門菌污染的食品進(jìn)行分類管理，以此有效地預(yù)防由于沙門菌引起的疾病。沙門菌的檢測(cè)作為食品衛(wèi)生與質(zhì)量檢測(cè)的一項(xiàng)重要指標(biāo)，已被世界各國(guó)應(yīng)用于食品

2、檢測(cè)中。目前，食品中沙門菌的檢測(cè)方法種類繁多，應(yīng)用最為廣泛的仍是沙門菌國(guó)標(biāo)法檢測(cè)法，該方法的檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，但檢測(cè)周期較長(zhǎng)，操作繁瑣，不能滿足現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)的要求。建立一種能夠滿足結(jié)果準(zhǔn)確、易操作、易保存、價(jià)格低廉的快速檢測(cè)方法，并具有較好的普及推廣性成為亟待解決的課題。現(xiàn)今國(guó)內(nèi)已有部分微生物檢測(cè)顯色培養(yǎng)基投入使用，這些培養(yǎng)基產(chǎn)品主要為國(guó)外進(jìn)口產(chǎn)品，但價(jià)格昂貴，檢測(cè)成本過高，在國(guó)內(nèi)大范圍推廣使用受到限制。為滿足國(guó)內(nèi)對(duì)沙門菌快速檢測(cè)顯色

3、培養(yǎng)基的迫切需求，本課題利用微生物的特異性酶和與之相對(duì)應(yīng)的顯色底物，研制出能夠快速檢測(cè)面制品中沙門菌的顯色培養(yǎng)基，并對(duì)其檢測(cè)效果進(jìn)行評(píng)價(jià)，以期獲得符合面制品現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)要求，并具有較高的靈敏度和特異性的經(jīng)濟(jì)型沙門菌快速檢測(cè)產(chǎn)品。
　　 方法:
　　 以普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板為基礎(chǔ)，添加促進(jìn)沙門菌生長(zhǎng)和抑制其它菌屬生長(zhǎng)的物質(zhì):瓊脂、蛋白胨、酵母膏粉、氯化鈉、月桂基硫酸鈉、碳酸鈉、L-胱氨酸，通過正交優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，確定基礎(chǔ)培養(yǎng)基的成分和濃

4、度，通過單因素分析確定酶顯色底物濃度，最終確定配方，制得沙門菌快速檢測(cè)顯色培養(yǎng)基（RapiddetectionofSalmonellaChromogenicMedium,RSCM）。
　　 以沙門菌國(guó)標(biāo)檢測(cè)法為比照，分析沙門菌快速檢測(cè)顯色培養(yǎng)基的顯色效果、出菌率、相關(guān)性、特異性、靈敏度，結(jié)合檢出時(shí)間及成本等方面綜合評(píng)價(jià)RSCM的檢測(cè)性能。
　　 結(jié)果:
　　 ①RSCM在36℃±1℃培養(yǎng)12h即可通過觀察菌落顏色

5、直接鑒別沙門菌菌屬，顯色清晰穩(wěn)定，結(jié)果易于觀察。
　　 ②RSCM與國(guó)標(biāo)檢測(cè)法中采用的木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂(XyloseLysineDeoxycholateAgar，XLD)培養(yǎng)基、亞硫酸鉍瓊脂(BismuthSulfiteAgar,BS)培養(yǎng)基的出菌率對(duì)比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=0.757，P＞0.05)。
　　 ③RSCM與國(guó)標(biāo)檢測(cè)法中采用的XLD培養(yǎng)基和BS培養(yǎng)基進(jìn)行相關(guān)性分析，關(guān)系數(shù)分別為0.996、0.997

6、，相關(guān)程度較高，在沙門菌菌落計(jì)數(shù)精確度方面RSCM平板與另外兩種培養(yǎng)基平板效果相當(dāng)。
　　 ④RSCM與沙門菌國(guó)標(biāo)檢測(cè)法相比，有較高的特異性和靈敏度，并且在檢測(cè)成本和檢測(cè)時(shí)間方面優(yōu)于國(guó)標(biāo)檢測(cè)法。
　　 ⑤RSCM與沙門菌國(guó)標(biāo)檢測(cè)法對(duì)于食品樣品的檢測(cè)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且RSCM無(wú)需輔助檢測(cè)設(shè)備，價(jià)格便宜、操作簡(jiǎn)便、檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。
　　 結(jié)論:
　　 自主研制的沙門菌快速檢測(cè)顯色培養(yǎng)基在性能上與沙門菌國(guó)標(biāo)