廣西肝癌高、低發(fā)區(qū)CYP3A4、CYP3A5基因多態(tài)性的對(duì)比研究.pdf

1、背景與目的：肝細(xì)胞癌(HCC)是我國(guó)最常見的惡性腫瘤之一，多種致病因素與HCC發(fā)生相關(guān)，其中HBV的長(zhǎng)期感染和AFB1攝入量的增加是導(dǎo)致HCC的兩大重要病因。然而，在相同水平AFB1暴露和HBV感染的情況下，肝癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)存在很大的個(gè)體差異，提示遺傳因素也可能是肝癌重要的病因。研究表明，AFB1要經(jīng)細(xì)胞色素P450酶(CYP450)系統(tǒng)氧化為AFB1-外-8，9-環(huán)氧化物才有誘變作用。CYP450家族中含量最多、最重要的是CYP3A酶，

2、其中CYP3A4和CYP3A5是其兩個(gè)主要成員，它們的基因多態(tài)性可影響蛋白表達(dá)水平和氧化活性。本課題通過研究廣西肝癌高發(fā)區(qū)和低發(fā)區(qū)人群中的CYP3A4、CYP3A5的mRNA的表達(dá)及CYP3A5基因多態(tài)性，以探討CYP3A4、CYP3A5基因多態(tài)性與肝癌易感性的關(guān)系。 方法：病例一對(duì)照研究：收集廣西醫(yī)科大學(xué)一附院2005年12月-2006年9月期間經(jīng)病理確診的HCC患者72例，分別來自于肝癌高發(fā)區(qū)和低發(fā)區(qū)，取其肝癌組織及其癌旁組

3、織。12例血管瘤的瘤旁肝組織作為正常對(duì)照。用RT-PCR方法檢測(cè)CYP3A4和CYP3A5在上述標(biāo)本中的mRNA表達(dá)情況。并將實(shí)驗(yàn)結(jié)果與臨床病理資料(乙肝病毒感染、病理分級(jí)、血清AFP水平、腫瘤直徑，肝內(nèi)外轉(zhuǎn)移)進(jìn)行比較分析。用PCR—RFLP法檢測(cè)CYP3A5在上述標(biāo)本中的多態(tài)性。 結(jié)果： 1.RT—PCR檢測(cè)高發(fā)區(qū)和低發(fā)區(qū)肝癌、癌旁組織、正常肝組織中CYP3A4 mRNA的表達(dá)，高發(fā)區(qū)分別為0.58±0.07、0.5

4、1±0.07，低發(fā)區(qū)分別為0.67±0.05、0.48±0.05，正常肝組織為0.98±0.08。其中高發(fā)區(qū)及低發(fā)區(qū)肝癌組織CYP3A4 mRNA的表達(dá)與癌旁組織比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，而癌組織及癌旁組織與正常肝組織問比較，二者差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。CYP3A4mRNA的表達(dá)與腫瘤的分化程度、乙肝病毒感染有關(guān)(P<0.05)，而與血清AFP水

5、平、腫瘤直徑，肝內(nèi)外轉(zhuǎn)移情況無明顯關(guān)系(P>0.05)。 2.RT—PCR檢測(cè)肝癌高發(fā)區(qū)和低發(fā)區(qū)癌組織、癌旁組織、正常肝組織中CYP3A5mRNA的表達(dá)，高發(fā)區(qū)分別為0.95±0.10、0.62±0.09，低發(fā)區(qū)分別為0.67±0.11、0.56±0.21，正常肝組織為0.48±0.09；高發(fā)區(qū)及低發(fā)區(qū)癌組織的表達(dá)明顯高于癌旁組織和正常肝組織，二者比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；而高發(fā)區(qū)癌組織明顯高于低發(fā)區(qū)癌組織，差異均

6、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。CYP3A5mRNA的表達(dá)與腫瘤的分化程度、乙肝病毒感染有關(guān)(P<0.05)，而與血清AFP水平、腫瘤直徑，肝內(nèi)外轉(zhuǎn)移情況無明顯關(guān)系(P>0.05)。 3.高發(fā)區(qū)40例和低發(fā)區(qū)32例肝癌及正常12例肝組織的CYP3A4mRNA與CYP3A5mRNA的表達(dá)有明顯的相關(guān)性，且成負(fù)相關(guān)。相關(guān)系數(shù)r=-0.184，p=0.04(P<0.05)。 4.PCR—RFLP檢測(cè)結(jié)果：廣西高發(fā)區(qū)肝癌患者CYP

7、3A5*l等位基因頻率和基因型(CYP3A5*1/*1+CYP3A5*1/*3)比例均比廣西低發(fā)區(qū)肝癌患者和正常對(duì)照組的高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，低發(fā)區(qū)與正常對(duì)照組之間比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 結(jié)論：研究結(jié)果顯示， ①CYP3A4 mRNA在廣西肝癌高發(fā)區(qū)和低發(fā)區(qū)肝癌組織中的表達(dá)均低于正常肝組織，推測(cè)CYP3A4可能參與AFBl的解毒功能。 ②廣西CYP3A5 mRNA在高發(fā)區(qū)肝癌組織