吡格列酮（Pioglitazone）對大鼠局灶性腦缺血的保護作用及其PPARγ依賴性抑制NF-κB信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的機制.pdf

1、目的：觀察吡格列酮(Pioglitazone，Piog)對大鼠永久性局灶性腦缺血的保護作用及其過氧化物酶體增殖劑激活受體γ(peroxisome proliferation-activated receptor,PPARγ)依賴性抑制NF-кB信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的作用。 方法：采用大鼠永久性大腦中動脈阻塞(permanent middle cerebral artery occlusion，pMCAO)模型觀察Piog 0.5、1、2

2、mg/kg對腦梗塞體積、腦水腫、行為學(xué)癥狀的影響。大鼠腦缺血前24小時、腦缺血時兩次腹腔注射Piog，或者，大鼠腦缺血后10分鐘一次腹腔注射Piog。大鼠腦缺血前30 min側(cè)腦室注射PPARγ的特異性的抑制劑GW9662150、300、600nmol/kg，大鼠腦缺血后10分鐘一次腹腔注射Piog 1mg/kg，采用pMCAO模型觀察GW9662對腦梗塞體積及NF-кB信號通路的.影響。采用Western-blot法檢測紋狀體boBα

3、、p-ERK的蛋白水平；應(yīng)用免疫組織化學(xué)法分析紋狀體NF-кB的核轉(zhuǎn)位；采用RT-PCR法檢測紋狀體NF-кB靶基因p53 mRNA的表達。 結(jié)果：Piog 0.5、1、2mg/kg腹腔注射呈劑量依賴性改善行為學(xué)癥狀，減少pMCAO大鼠腦梗死體積，降低腦含水量(P<0.05，P<0.01)。GW9662 300、600nmol/kg能拮抗Piog對腦缺血的保護作用。Western-blot顯示：大鼠pMCAO后6小時紋狀體IкB

4、α的蛋白含量顯著減少(P<0.01)，Piog 0.5、1、2mg/kg能顯著增加紋狀體IKBα的蛋白含量(P<0.01)，GW9662 300、600nmol/kg能顯著降低紋狀體IкBα的蛋白含量(P<0.01)；大鼠pMCAO后12小時紋狀體p-ERK的蛋白含量顯著減少(P<0.01)，Piog0.5、1、2mg/kg能顯著增加紋狀體p-ERK蛋白含量(P<0.01)，GW9662 300、600nmol/kg能顯著降低紋狀體的p

5、-ERK蛋白含量(P<0.01)；免疫組化證明：假手術(shù)組大鼠大腦紋狀體NF-кB主要表達在神經(jīng)細胞胞漿中，pMCAO后12小時，模型組大鼠大腦紋狀體NF-кB主要表達于神經(jīng)細胞胞核，說明缺血使NF-кB從細胞漿移位至細胞核；Piog 0.5、1、2mg/kg能抑制NF-кB的核轉(zhuǎn)位(P<0.01)；GW9662 300、600nmol/kg能拮抗Piog對NF-кB的核轉(zhuǎn)位的抑制(P<0.05)。RT-PCR結(jié)果表明：大鼠pMCAO后1