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1、目的:研究虹膜血管緊密連接的變化與角膜移植免疫排斥反應(yīng)之間的關(guān)系,進(jìn)一步揭示角膜移植免疫排斥反應(yīng)的發(fā)生機(jī)理。方法以C57BL/6小鼠為供體,BALB/c小鼠為受體,制作穿透性角膜移植模型40只。其中20只前房植入環(huán)孢素A緩釋系統(tǒng)(CSA-DDS);為B組,余為A組。應(yīng)用虹膜鋪片技術(shù)、免疫組化技術(shù)及分子生物學(xué)檢查,檢測(cè)不同時(shí)間虹膜血管CD31、緊密連接蛋白Z0-1、occludin及金屬基質(zhì)蛋白酶9(MMP-9)的變化。 結(jié)果:虹
2、膜鋪片免疫熒光顯示:A組術(shù)后7天可見(jiàn)CD31陽(yáng)性血管密度增加,管腔明顯增粗;B組術(shù)后18天,虹膜血管管腔變粗;排斥時(shí)兩組虹膜血管管腔均較正常粗,走形僵直。眼球冰凍切片示:A組術(shù)后7天,B組術(shù)后18天小鼠虹膜緊密連接蛋白Z0-1表達(dá)無(wú)明顯變化,MMP-9表達(dá)明顯增加;排斥時(shí)Z0-1的表達(dá)較正常減少,MMP-9表達(dá)明顯增加。RT-PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn):A組術(shù)后3、7、12、18天MMP-9表達(dá)均高于正常;B組3天時(shí)表達(dá)明顯增多后急劇下降,但18天
3、時(shí)又高于正常。A組術(shù)后3天occludin表達(dá)一過(guò)性增加,之后逐漸下降,至18天達(dá)最低,B組呈緩慢的下降趨勢(shì)。A組術(shù)后3天、12天Z0-1表達(dá)明顯增多,7天、18天時(shí)表達(dá)較正常明顯下降。B組3天明顯高于正常,之后逐漸下降,18天時(shí)表達(dá)與正常無(wú)明顯差別。 結(jié)論:角膜移植免疫排斥反應(yīng)發(fā)生時(shí)iris angioedema andcoarsen虹膜血管水腫,管腔變粗,緊密連接蛋白ZO-1、occludin表達(dá)減少,前房植入CSA可延緩這
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