ICOS共刺激通路參與角膜移植免疫排斥反應的實驗研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學博士學位論文ICOS共刺激通路參與角膜移植免疫排斥反應的實驗研究姓名：袁偉申請學位級別：博士專業(yè)：免疫學指導教師：陸曉和20080606主塞摘要第一部分ICOS共刺激通路參與角膜移植免疫排斥反應的研究目的通過建立大鼠同種異體穿透性角膜移植模型，研究ICOS共刺激通路與角膜移植急性免疫排斥反應的關系。方法取健康清潔級Wistar大鼠及SD大鼠，分為移植組和正常對照組。移植組以10只Wistar大鼠為供體，20只SD大鼠為受體，

2、建立同種異體穿透性角膜移植模型；對照組為5只健康清潔級正常SD大鼠(10眼)。移植術后每日在裂隙燈顯微鏡下觀察角膜植片情況，并對角膜混濁、水腫、新生血管3項指標進行評分。分別于術后7天、14天取植片進行病理學觀察，并采用RTPCR法檢測植片組織ICOSmRNA的表達情況，免疫組織化學法檢測植片組織ICOS蛋白水平；同時采用流式細胞術檢測外周血CD3ICOST／CD3T的表達情況，并以正常大鼠作對照。結果(1)術后觀察：大鼠同種異體穿透性

3、角膜移植術后7天均未發(fā)生排斥反應，術后第9天開始有大鼠植片發(fā)生排斥反應，至術后14天時角膜植片皆已發(fā)生不同程度的排斥反應。(2)IIE染色結果：移植術后7天時角膜植片水腫增厚，基質纖維排列紊亂，縫線及切口周圍出現(xiàn)大量單核細胞和淋巴細胞浸潤，植片中央也可見散在的炎性細胞浸潤，術后14天較術后7天更為明顯。炎性細胞主要存在于上皮層和淺層基質。(3)ICOS蛋白表達情況：細胞膜、細胞漿呈棕黃色染色者為ICOS陽性細胞。正常大鼠角膜組織各層均無