VOCs指紋圖快速質(zhì)譜鑒定結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群的研究.pdf

1、目的：探討質(zhì)譜技術(shù)對結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群相關(guān)標(biāo)記物檢測和鑒定，判斷VOCs標(biāo)記物及VOCs指紋圖對結(jié)核病的診斷和鑒別診斷價值。
　　方法：采用表面解吸常壓化學(xué)電離質(zhì)譜（SDAPCI-MS）技術(shù)對結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群（Mycobacteriumtuberculosiscomplex,MTC）及其相似菌屬如非結(jié)核分枝桿菌（Nontuberculosismycobacteria,NTM）、諾卡氏菌、馬紅球菌、鏈霉菌及齲齒羅氏菌的培養(yǎng)基上層行

2、VOCs檢測，同時對臨床常見細(xì)菌和真菌檢測，以確定MTC特異性標(biāo)記物及釋放時間規(guī)律。通過碰撞誘導(dǎo)解離（CID）技術(shù)鑒定特異譜峰的分子量和分子結(jié)構(gòu)式，并用Matlab對其行主成分分析（PCA）以評估不同種屬細(xì)菌VOCs之間的關(guān)系。
　　結(jié)果：質(zhì)譜檢測所得VOCs指紋圖可準(zhǔn)確鑒別MTC與多種在生物學(xué)特性和臨床感染上的相似菌屬，主成分分析可將所有菌明顯的相互區(qū)分。煙酸甲酯（m/z138）特異性存在于MTC培養(yǎng)基上層，在培養(yǎng)第9天，肉眼可

3、見菌落之前即可檢出。m/z140和m/z152在MTC培養(yǎng)基上層中含量顯著高于其他菌屬（P<0.01,Fisher’s精確檢驗），是MTC相關(guān)標(biāo)記物。本實驗中所有菌共同產(chǎn)生的VOCs主要有2-苯乙醇（m/z122），甲酸乙酯（m/z74），丙酸（m/z76），苯甲酸（m/z108），普遍存在于其他細(xì)菌培養(yǎng)基上層，是細(xì)菌在代謝過程中有機(jī)酸或醇類的積聚。
　　結(jié)論：SDAPCI-MS通過檢測微生物的揮發(fā)性代謝產(chǎn)物，快速、高效的作出MT