氧活性產(chǎn)物介導(dǎo)縮血管活性物質(zhì)促進(jìn)心肌細(xì)胞分泌內(nèi)皮素.pdf

1、目的：探討氧活性產(chǎn)物(reactiveoxygenspecies，ROS)在血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)，內(nèi)皮素-1(ET-1)等縮血管活性物質(zhì)在致心肌細(xì)胞肥大時(shí)同時(shí)促進(jìn)心肌細(xì)胞分泌內(nèi)皮素中所起的作用。 方法：在原代培養(yǎng)的大鼠乳鼠心肌細(xì)胞中進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)分為5組，分別為空白對(duì)照組、加有ET-1組、加有AngⅡ組、加有ET-1和N-乙酰半胱安酸(N-acetylcysteine)組、加有AngⅡ和N-acetylcysteine組。細(xì)

2、胞內(nèi)的氧活性產(chǎn)物用ROS敏感的熒光探針2，7-dichlorofluorescindictate(DCF-DA)來(lái)檢測(cè)。用RT-PCR的方法檢測(cè)內(nèi)皮素基因的表達(dá)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：空白對(duì)照組細(xì)胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)極少量氧活性產(chǎn)物的生成；內(nèi)皮素-1基因僅少量表達(dá)。所有加有N-乙酰半胱安酸(N-acetylcysteine)的實(shí)驗(yàn)組內(nèi)僅有極少量氧活性產(chǎn)物，和對(duì)照組相比細(xì)胞內(nèi)DCF-DA熒光強(qiáng)度增加分別為N-acetylcysteine加有ET-1組增

3、加4.8％，N-acetylcysteine加有AngⅡ組增加3.0％；內(nèi)皮素-1基因的表達(dá)與空白對(duì)照組沒有明顯差異，Prepro-ET相對(duì)量增加依次為N-acetylcysteine加有ET-1組增加3.8％，N-acetylcysteine加用AngⅡ組增加2.9％。ET-1及AngⅡ組均見到大量氧活性產(chǎn)物，細(xì)胞內(nèi)DCF-DA熒光強(qiáng)度增加依次為108.8％，104.9％；內(nèi)皮素-1基因的表達(dá)也明顯增強(qiáng)，Prepro-ET相對(duì)增量加依

4、次為52.4％，51.1％。 結(jié)論：實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)在單純加入ET-1、AngⅡ等縮血管因子的的實(shí)驗(yàn)組中ROS的量顯著增加，而空白對(duì)照組和同時(shí)加入N-acetylcysteine與縮血管因子的實(shí)驗(yàn)組中則ROS的量極小，這提示ROS在縮血管因子致心肌心細(xì)胞的肥大過(guò)程中起到信號(hào)傳遞作用。同時(shí)也發(fā)現(xiàn)在單純加入ET-1、AngⅡ等縮血管因子的的實(shí)驗(yàn)組中心肌表達(dá)內(nèi)皮素的量顯著增加，而在空白對(duì)照組和同時(shí)加入N-acetylcysteine與縮血