甲基蓮心堿保護LPC誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞損傷及其機制的研究.pdf

1、目的：觀察甲基蓮心堿對溶血性磷脂酰膽堿(LPC)誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護作用，并對其作用機制進行研究。 方法：以10 μg/ml的LPC作用于人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)細(xì)胞共孵育24小時誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞損傷，建立細(xì)胞損傷的模型；以0.1、1.0、10.0 μmol/l的甲基蓮心堿預(yù)先作用于HUVEC細(xì)胞1小時，再予10 μg/ml的LPC作用于HUVEC細(xì)胞共孵育24小時；并設(shè)立空白對照組及甲基蓮心堿(10.0 μmol/l)

2、組；收集細(xì)胞上清液測定乳酸脫氫酶(LDH)、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)和非對稱性二甲基精氨酸(ADMA)濃度，收集細(xì)胞測定細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)水平。用分光光度計法測定LDH漏出量；硝酸還原酶法檢測細(xì)胞上清液中NO的含量；硫代巴比妥法檢測細(xì)胞上清液中MDA的含量；高效液相色譜法檢測細(xì)胞上清液中ADMA；熒光法測定細(xì)胞內(nèi)ROS水平。 結(jié)果：1．與對照組比較，LPC(10 μg/ml)作用于HUVEC-12細(xì)胞24小時后，顯

3、著性增加細(xì)胞培養(yǎng)上清液中LDH含量(P<0.05)、MDA含量(P<0.05)、ADMA含量(P<0.05)及細(xì)胞內(nèi)ROS水平(P<0.05)，顯著性降低細(xì)胞培養(yǎng)上清液中NO含量(P<0.05)。2．與LPC損傷組比較，0.1、1.0、10．0 μmol/l的甲基蓮心堿預(yù)先作用于HUVEC-12細(xì)胞1小時，再予終濃度為10 μg/ml的LPC作用于HUVEC-12細(xì)胞共孵育24小時，均能顯著性降低細(xì)胞培養(yǎng)上清液中LDH含量(P<0.05

4、)、MDA含量(P<0.05)、ADMA含量(P<0.05)及細(xì)胞內(nèi)ROS水平(P<0.05)，顯著性升高細(xì)胞上清液中NO含量(P<0.05)。3．與對照組比較，甲基蓮心堿(10.0 μmol/l)本身對細(xì)胞上清液中LDH含量(P>0.05)、NO含量(P>0.05)、MDA含量(P>0.05)、ADMA含量(P>0.05)及細(xì)胞內(nèi)ROS水平(P>0.05)沒有顯著性差異。 結(jié)論：1．甲基蓮心堿對LPC誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷有保