人甲胎蛋白基因原核克隆和表達(dá).pdf

1、甲胎蛋白(Alpha-Fetoprotein,AFP)是個(gè)70KDa的糖蛋白,在胎兒期由胎肝大量事成,在出生后則表達(dá)急劇下降.由于甲胎蛋白在原發(fā)性肝癌中也有高表達(dá),既往多將甲胎蛋白用于肝癌的早期診斷和病情監(jiān)測.最近研究表明,甲胎蛋白有著復(fù)雜的生物功能,具有既能抑制免疫功能間接促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長又能直接促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長的雙重作用.同時(shí),甲胎蛋白多肽片斷在和MHC分子結(jié)合后能被細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(CTL)所識(shí)別.因此,作為原發(fā)性肝癌的腫瘤相關(guān)

2、性抗原(TAA),甲胎蛋白完全有可能充當(dāng)肝癌免疫治療的靶分子.但從人血中提取純化甲胎蛋白的量小且成本昂貴.該實(shí)驗(yàn)通過大腸桿菌等基因工程菌獲得著重組甲胎蛋白,為進(jìn)一步研究開發(fā)甲胎蛋白抗腫瘤奠定了基礎(chǔ).結(jié)論:1、成功構(gòu)建了重組質(zhì)粒pGEMEX-AFP1、pGEMEX-AFP2、pGEMEX-AFP3,經(jīng)序列分析證實(shí)對(duì)碼、序列無誤.2、SDS-PAGE證實(shí)經(jīng)重組質(zhì)粒pGEMEX-AFP1、pGEMEX-AFP2、pGEMEX-AFP3轉(zhuǎn)化的大