激活態(tài)雪旺細(xì)胞聯(lián)合硫酸鎂修復(fù)脊髓損傷的研究.pdf

1、[目的]探討激活態(tài)雪旺細(xì)胞(activated schwann cells，ASCs)聯(lián)合硫酸鎂(magnesium sulfate，MgSO4)在修復(fù)脊髓損傷中的作用，并評(píng)價(jià)該方法對(duì)脊髓損傷的療效。 [方法]通過(guò)結(jié)扎Wistar幼鼠雙后肢隱神經(jīng)從而激活雪旺細(xì)胞并進(jìn)行體外分離、培養(yǎng)、純化、傳代獲得大量細(xì)胞。Wistar大鼠48只以MASCIS IMPACTORMODEL-II打擊器制備脊髓胸10(T10)損傷模型。隨機(jī)分為4組，

2、每組12只：?jiǎn)渭僁MEM對(duì)照組、MgSO4組、ASCs移植組和MgSO4聯(lián)合ASCs移植組。術(shù)后每周每組隨機(jī)選取8只大鼠進(jìn)行肢體功能恢復(fù)情況的行為學(xué)評(píng)分(BBB評(píng)分)。12周后每組隨機(jī)選擇4只動(dòng)物進(jìn)行10％BDA神經(jīng)順行示蹤皮質(zhì)脊髓束(corticospinaltract，CST)標(biāo)記，標(biāo)記2周后(術(shù)后14周)處死動(dòng)物，取出動(dòng)物損傷段脊髓作5μm快速冰凍切片后，進(jìn)行Cy3熒光染色；同時(shí)制備脊髓石蠟切片進(jìn)行神經(jīng)絲蛋白(Neurofilam

3、ent protein200，NF-200)和膠質(zhì)原纖維酸性蛋白(glialfibrillaryacidic protein，GFAP)免疫熒光染色。各種免疫熒光染色數(shù)字圖像結(jié)果經(jīng)Volocity LE32.6.1組織切片圖像分析軟件處理，以免疫陽(yáng)性反應(yīng)的面積比進(jìn)行比較。采用方差分析(ANOVA)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，比較各組的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 [結(jié)果]所有大鼠在脊髓損傷后均出現(xiàn)下肢截癱。損傷后4周，各組BBB評(píng)分實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組