激活態(tài)雪旺細胞聯(lián)合硫酸鎂修復(fù)脊髓損傷的研究.pdf

1、[目的]探討激活態(tài)雪旺細胞(activated schwann cells，ASCs)聯(lián)合硫酸鎂(magnesium sulfate，MgSO4)在修復(fù)脊髓損傷中的作用，并評價該方法對脊髓損傷的療效。 [方法]通過結(jié)扎Wistar幼鼠雙后肢隱神經(jīng)從而激活雪旺細胞并進行體外分離、培養(yǎng)、純化、傳代獲得大量細胞。Wistar大鼠48只以MASCIS IMPACTORMODEL-II打擊器制備脊髓胸10(T10)損傷模型。隨機分為4組，

2、每組12只：單純DMEM對照組、MgSO4組、ASCs移植組和MgSO4聯(lián)合ASCs移植組。術(shù)后每周每組隨機選取8只大鼠進行肢體功能恢復(fù)情況的行為學(xué)評分(BBB評分)。12周后每組隨機選擇4只動物進行10％BDA神經(jīng)順行示蹤皮質(zhì)脊髓束(corticospinaltract，CST)標記，標記2周后(術(shù)后14周)處死動物，取出動物損傷段脊髓作5μm快速冰凍切片后，進行Cy3熒光染色；同時制備脊髓石蠟切片進行神經(jīng)絲蛋白(Neurofilam

3、ent protein200，NF-200)和膠質(zhì)原纖維酸性蛋白(glialfibrillaryacidic protein，GFAP)免疫熒光染色。各種免疫熒光染色數(shù)字圖像結(jié)果經(jīng)Volocity LE32.6.1組織切片圖像分析軟件處理，以免疫陽性反應(yīng)的面積比進行比較。采用方差分析(ANOVA)對實驗結(jié)果進行統(tǒng)計學(xué)分析，比較各組的統(tǒng)計學(xué)差異。 [結(jié)果]所有大鼠在脊髓損傷后均出現(xiàn)下肢截癱。損傷后4周，各組BBB評分實驗組較對照組