環(huán)孢素A完全抗原的制備及鑒定.pdf

1、目的:CsA為小分子環(huán)狀十一肽化合物，只是半抗原分子，不具有免疫原性，而且其結(jié)構(gòu)中缺乏與載體蛋白相偶聯(lián)的活性基團(tuán)。本課題的目的是設(shè)計(jì)正確的合成路線，優(yōu)化合成工藝，制備CsA完全抗原。首先對(duì)CsA分子的化學(xué)結(jié)構(gòu)進(jìn)行修飾，引入活性基團(tuán)；然后與蛋白載體相偶聯(lián)，形成完全抗原。制備環(huán)孢素A完全抗原，為熒光偏振免疫監(jiān)測(cè)試劑盒的研制作準(zhǔn)備。 方法:課題選擇光化學(xué)反應(yīng)對(duì)CsA分子的化學(xué)結(jié)構(gòu)進(jìn)行修飾，引入活潑基團(tuán)-羧基。光敏交聯(lián)劑選擇4-苯甲酰苯

2、甲酸。以高壓汞燈作為紫外光源，叔丁醇作為反應(yīng)溶劑，進(jìn)行4-苯甲酰苯甲酸（Bba）和環(huán)孢素A（CsA）的提氫-偶合及光環(huán)化加成反應(yīng)，得到中間體CsA-Bba共軛物。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中采用正交試驗(yàn)的方法優(yōu)化了合成工藝，確定了最佳的合成條件。偶聯(lián)反應(yīng)選擇聚L-賴(lài)氨酸(PL)作為蛋白載體。將CsA-Bba共軛物溶于DMF中，再在EDCI作用下與水溶液中的聚L-賴(lài)氨酸(PL)反應(yīng)，生成完全抗原CsA-Bba-PL。 結(jié)果:實(shí)驗(yàn)對(duì)反應(yīng)物4-苯甲酰苯