犬細(xì)小病毒新抗原變異株的分離鑒定及單克隆抗體的制備.pdf

1、犬細(xì)小病毒病是由犬細(xì)小病毒(Canine parvovims，CPV)引起的犬及其他食肉動物的一種具有高度接觸性的傳染病。犬細(xì)小病毒為單鏈線狀DNA病毒，主要結(jié)構(gòu)蛋白為VP1和VP2。VP2基因全長1755bp，編碼CPV的主要抗原決定簇可誘導(dǎo)機體產(chǎn)生中和抗體，決定著抗原型及宿主的特異性。 本研究從臨床疑似病犬的糞便中分離出CPV，用常規(guī)方法和分子生物學(xué)的方法予以鑒定，并以病毒為抗原，建立了一株抗CPV單克隆細(xì)胞株，為研究CPV

2、變異及制備CPV特異性診斷試劑和治療奠定了基礎(chǔ)。 一、犬細(xì)小病毒新抗原變異株VP2基因的克隆與序列分析：從疑似病犬糞便中提取DNA，根據(jù)基因庫CPV-d序列設(shè)計引物，PCR擴增出VP2基因并測序，與標(biāo)準(zhǔn)序列進(jìn)行同源性分析從而鑒定犬細(xì)小病毒抗原變異株的抗原型。結(jié)果表明：得到VP2序列16份， 5份為CPV-2b型，1份為FPV，10份為CPV-2a型；與CPV-VP2標(biāo)準(zhǔn)序列相比，同源性都在98％以上。 二、犬細(xì)小病毒抗原