基于髓樣抑制細胞的黃芪多糖抗B16-F10黑色素瘤機制研究.pdf

1、黃芪作為常用的中草藥，它是豆科多年生草本植物蒙古黃芪、膜莢黃芪的根，有托瘡生肌、利尿排毒、利水消腫和補氣固表等功效。黃芪多糖作為黃芪中的主要有效成分，具有抗腫瘤、抗氧化、抗炎、抗病毒、降血糖、降血脂、免疫調節(jié)和保肝、護肝等作用，目前在臨床上已經得到了廣泛應用。
　　 腫瘤免疫逃逸，促進了腫瘤的生長與轉移，是腫瘤沒有較好療效的一個原因。髓樣抑制細胞是腫瘤組織中聚集著的一群表面標志為Gr-1+CD11b+的異質細胞，是引起免疫逃逸的

2、重要細胞群體。抑制機體髓樣抑制細胞的生成，進而減輕腫瘤所產生的免疫逃逸現(xiàn)象，目前已經成為了腫瘤治療的新方向。由于對黃芪多糖抗腫瘤免疫機制的研究主要涉及:巨噬細胞、樹突狀細胞、T細胞、B細胞和自然殺傷細胞等方面，但對髓樣抑制細胞方面的研究較少。為此，本論文以B16-F10荷瘤鼠作為研究對象，探討黃芪多糖對B16-F10荷瘤鼠髓樣抑制細胞的影響及其抗免疫耐受分子機制，為黃芪多糖的抗腫瘤免疫效應機制提供新的依據。具體工作內容如下:
　　

3、 1.建立B16-F10荷瘤鼠模型，通過檢測B16-F10荷瘤鼠的腫瘤體積變化和抑瘤率，觀察黃芪多糖的體內抑瘤作用;并利用流式細胞術檢測脾臟中Gr-1＋CD11b＋髓樣抑制細胞比例，觀察黃芪多糖對B16-F10荷瘤鼠髓樣抑制細胞的影響;同時采用流式細胞術檢測脾臟中調節(jié)性T細胞比例、酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清中IL-10、TGF-β、VEGF、IFN-γ和TNF-α的分泌水平，研究黃芪多糖對髓樣抑制細胞的抗免疫耐受分子機制。結果顯示:造模第

4、六天，與模型組相比，黃芪多糖低劑量組、黃芪多糖低劑量＋CTX組、黃芪多糖高劑量組和黃芪多糖高劑量＋CTX組的腫瘤被顯著抑制(P＜0.01)。造模第六天、第八天、第十天和第十二天，與CTX組相比，黃芪多糖低劑量+CTX組和黃芪多糖高劑量+CTX組的腫瘤均被顯著抑制(P＜0.01)。CTX組、黃芪多糖低劑量組、黃芪多糖低劑量+CTX組、黃芪多糖高劑量組和黃芪多糖高劑量+CTX組的抑瘤率分別為:53.82％、35.26％、71.42％、49.

5、82％、78.89％。與模型組相比，CTX、黃芪多糖低劑量組、黃芪多糖低劑量+CTX組、黃芪多糖高劑量組和黃芪多糖高劑量+CTX組均可以降低脾臟Gr-1+CD11b+髓樣抑制細胞比例(P＜0.01)，此外CTX組、黃芪多糖低劑量、黃芪多糖低劑量+CTX、黃芪多糖高劑量和黃芪多糖高劑量+CTX組的荷瘤鼠脾臟中調節(jié)性T細胞比例顯著下降(P＜0.01)，血清中IL-10、TGF-β和VEGF分泌水平也顯著下降(P＜0.01)，同時，IFN-Υ

6、和TNF-α分泌水平顯著提升(P＜0.05，P＜0.01)。
　　 2.建立B16-F10荷瘤鼠模型，通過B16-F10荷瘤鼠的體重變化、脾指數(shù)和生化指標，觀察黃芪多糖與CTX聯(lián)合治療對CTX的增效減毒作用。結果顯示:造模后第六天，與正常組相比，CTX組體重下降(P＜0.05)，但黃芪多糖治療組無顯著差異;與CTX組相比，黃芪多糖低劑量和黃芪多糖高劑量組的荷瘤鼠的脾指數(shù)顯著升高（P＜0.01）;黃芪多糖低劑量組、黃芪多糖低劑量+