白癜風(fēng)患者血清中單純皰疹病毒及抗體的檢測(cè).pdf

1、前言：
　　 白癜風(fēng)是一種后天獲得的色素脫失性疾病。白癜風(fēng)的發(fā)病機(jī)制包括自身免疫學(xué)說(shuō)、黑素細(xì)胞自毀學(xué)說(shuō)、神經(jīng)化學(xué)因子學(xué)說(shuō)、遺傳學(xué)說(shuō)等。臨床上通常分為五型,即散發(fā)型、泛發(fā)型、節(jié)段型、局限型及面部/肢端型。近年來(lái),Verson在試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)皰疹病毒與白癜風(fēng)有一定關(guān)系,即皰疹病毒可能是白癜風(fēng)發(fā)病的一個(gè)刺激因素;Grimes等也現(xiàn)38%的白癜風(fēng)標(biāo)本(12/29)存在巨細(xì)胞病毒DNA,但是并沒(méi)有檢測(cè)到單純皰疹病毒、水痘帶狀皰疹病毒及人嗜T淋

2、巴細(xì)胞病毒的DNA;Ailoglu等檢測(cè)血清中人皰疹病毒6的IgG抗體,發(fā)現(xiàn)白癜風(fēng)組比對(duì)照組的陽(yáng)性率高。目前還沒(méi)有報(bào)告明確指出單純皰疹病毒和白癜風(fēng)的關(guān)系,但是注射了單純皰疹疫苗的小雞(Smyth Line Chicken)患自身免疫白癜風(fēng)的比例較高。
　　 單純疹病毒為嗜神經(jīng)病毒,能夠在神經(jīng)內(nèi)潛伏,機(jī)體免疫力低下時(shí),皰疹病毒復(fù)制,侵襲神經(jīng)引起單純皰疹。單純皰疹病毒也可以引起多形紅斑。多形紅斑是一種自限性炎癥反應(yīng)性疾病,皮損主要分

3、布于手足及粘膜等處。實(shí)驗(yàn)證明HSVDNA存在于多形紅斑的皮損中。面部肢端型白癜風(fēng)是一種特殊類(lèi)型的白癜風(fēng),皮損分布與多形紅斑相似,所以我們推測(cè)HSV可能作為這兩種疾病的始發(fā)因素,通過(guò)免疫機(jī)制或臨床病理學(xué)反應(yīng)侵襲了不同的靶位(角蛋白或黑素細(xì)胞)。為了驗(yàn)證這個(gè)假設(shè),我們利用PCR技術(shù)檢測(cè)血清中的HSVDNA,HSV陽(yáng)性說(shuō)明患者處于單純皰疹感染期。同時(shí)用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)白癜風(fēng)患者和對(duì)照組血清中的HSV抗體。
　　 材料和方法：
　　

4、 一、實(shí)驗(yàn)材料
　　 (一)病例與標(biāo)本
　　 于中國(guó)醫(yī)科大學(xué)皮膚科門(mén)診(2009年～2010年)收集臨床確診的白癜風(fēng)患者90例,其中42例男性,48例女性,年齡為4-70歲。病程為半個(gè)月到19年,包括泛發(fā)型2例,節(jié)段型6例,局限型7例,散發(fā)型50例,面部肢端型25例。其中急性期79例,穩(wěn)定期11例。90例中23例有白癜風(fēng)家族史。724例育齡期女性的HSV抗體結(jié)果作為陰性對(duì)照。5例急性期的單純皰疹患者(2例生殖器皰疹,3

5、例面部皰疹)做為陽(yáng)性對(duì)照。
　　 90例白癜風(fēng)患者均采取5毫升外周血,血清分離出來(lái),儲(chǔ)存于-80℃冰箱里,用來(lái)檢測(cè)單純皰疹病毒1/2型-抗體及其血清中的單純皰疹病毒DNA。同時(shí)采取5例單純皰疹患者的皮損,提取其中的DNA以備用。
　　 (二)主要試劑
　　 1、DNA提取試劑盒(TIANampVirusDNA/RNAKit,離心柱型,版本號(hào)RP090326,目錄號(hào)DP315);
　　 2、LIAISON@

6、HSV-1/2IgG,產(chǎn)品編號(hào)310800,生產(chǎn)批號(hào)075049;
　　 3、LIAISON@HSV-1/2IgM,產(chǎn)品編號(hào)310820,生產(chǎn)批號(hào)077044/1;
　　 4、PremixExTaqHotStartVersion(TaKaRaCode:DRR030A);
　　 5、DL500DNAMarker(TaKaRaCode:D525A);
　　 6、REGULARAGAROSEG-10(LOTNO

7、:111860;ORIGIN;SPAIN)。
　　 二、實(shí)驗(yàn)方法
　　 PCR技術(shù)(polymerasechainreaction)檢測(cè)白癜風(fēng)血清中的單純皰疹皰疹病毒DNA,及用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血清中單純皰疹病毒抗體。
　　 結(jié)果：
　　 90例白癜風(fēng)患者血清中均未檢測(cè)到HSVDNA,5例單純皰疹患者血清中未檢測(cè)到HSVDNA,其中3例皮損中檢測(cè)到HSVDNA。
　　 90例白癜風(fēng)患者中2例(2.2